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分裂酵母の浸透圧感受性変異株の解析による浸透圧情報の伝達と適応機構の解明

通过分析裂殖酵母渗透压敏感突变体阐明渗透压信息的传递和适应机制

基本信息

批准号：
08760076
负责人：
饗場浩文
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08760076/
关键词：
分裂酵母浸透圧応答情報伝達

项目摘要

本研究では第1に、グリセロール3リン酸デヒドロゲナーゼ遺伝子(gpd1^+)の浸透圧応答に関わるシス配列ならびにトランス因子の解析を行った。まず培地浸透圧に応答したgpd1^+遺伝子の転写開始点をS1マッピングにより決定した。決定した転写開始点の上流33塩基対付近にはTATA配列が認められた。浸透圧に応答した発現に関わるシス領域を決定するため、プラスミド上でgpd1^+プロモーター上流からの各種欠失変異遺伝子を作成した。これらのプラスミドで形質転換した分裂酵母(野生株ならびにwis1失株)を低浸透圧ならびに高浸透圧培地で生育させ、RNAを調節し、ノーザンハイブリダイゼーション法によってgpd1^+の発現量を解析した。その結果、転写開始点の上流52から92塩基対の領域に、浸透圧に応答した発現調節に必要なシス配列が存在することが明らかになった。この領域にはATF/CRE認識配列が認められた。最近、他の研究者によりgpd1^+の発現がAtf1(分裂酵母のATF/CREBホモログ)の支配下にあることが示された。よって、本研究によって明らかになったシス配列にAtf1が結合し、gpd1^+の転写調節を行っていると考えられる。第2に、高浸透圧感受性変異株の取得と解析の過程で取得したfpd2^+遺伝子の機能解析を行った。fpd2^+遺伝子はgpd1^+欠失変異株の高浸透圧感受性を相補する多コーピ-サプレッサーとして取得され、グリセロール3リン酸デヒドロゲナーゼのホモログをコードしていた。fpd2^+欠失変異株を作成し解析したところ、fpd2^+遺伝子はグリセロール合成能を有するものの、高浸透圧耐性機構への関与は認められなかった。興味深いことにgpd2^+欠失変異株は、その生育にヒスチジンまたはリジンの要求性を示した。今後、すでに取得している他の高浸透圧感受性変異株についても解析を進める予定である。

In this study, the number 1, the number 3, the number of acids, the number of cells (gpd1 ^ +) (gpd1 ^ +), soak, answer, answer, column, factor, factor, column, column Please soak the ground to answer the gpd1 ^ + write start point S1 to determine the decision. Decide on the starting point of writing. 33% of the upper level will be paid to the nearest TATA. Impregnated with the information you need to make a decision in the field of information management, you can use gpd1 ^ + to make sure that there are all kinds of outstanding information in the market. The yeast (wild strain, wis1 lost plant), low permeable yeast (wild strain, wis1 lost plant), low permeable yeast (wild strain, wild strain, lost plant), low permeable yeast (wild strain, wild strain, lost plant), low permeable yeast (wild strain, wild strain, lost plant), low permeable yeast (wild strain, wild strain, lost wis1), low permeable yeast (wild strain, wild strain, lost plant), low permeable yeast (wild strain, wild strain, lost plant), low permeable yeast (wild strain, wild strain, lost plant), low permeable yeast (wild strain, abortive strain), low permeable yeast (wild strain, abortive strain), low permeable yeast (wild strain, abortive strain), low permeable yeast (wild strain, abortive strain), low permeable yeast (wild strain, abortive strain), low permeable yeast (wild The results of the test, the starting point of writing, 52% and 92% of the basic field, and the results show that there are significant errors in the necessary configuration of the system. Do you know that your domain name ATF/CRE is assigned to you? Recently, a researcher called gpd1 ^ + ATF/CREB yeast Atf1 (mitotic yeast yeast) showed that he was under the control of the yeast. In this study, you will need to know that you will be assigned to Atf1 combination, gpd1 ^ +, and so on, so that you will be able to do some research. Second, the high permeation susceptibility strain was used to analyze the process and the fpd2 ^ + sub-machine was able to analyze the data. Fpd2^ + child