权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

時計遺伝子による癌関連遺伝子の転写制御を基盤にした癌診断法の開発

开发基于时钟基因对癌症相关基因的转录控制的癌症诊断方法

基本信息

批准号：
20014016
负责人：
大戸茂弘
金额：
$ 8.13万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20014016/
关键词：
生体リズム体内時計時間薬理がん診断法

项目摘要

本研究では、時計遺伝子による癌関連遺伝子の転写制御を基盤にした癌診断法を開発することを目的として以下の実験を行った。実験1:発癌物質および抗癌剤の感受性に及ぼす時計遺伝子の影響。実験2:癌関連遺伝子および薬剤感受性規定遺伝子の転写制御機構の解明。実験3:時計遺伝子と癌関連遺伝子および薬剤感受性規定遺伝子の相互関連の評価。昨年度は実験1を中心に実施し、各種薬剤による細胞障害における重要な役割を担う癌関連遺伝子および薬剤感受性規定遺伝子を抽出した。それらの遺伝子を対象に、本年度は実験2、3を実施し、癌関連遺伝子および薬剤感受性規定遺伝子の転写制御機構と時計遺伝子との相互関連について検討した。対象として、Clock変異マウスおよびWild typeマウスの肝臓および肝初代培養細胞を用いた。実験1で抽出された癌関連遺伝子および薬剤感受性規定遺伝子を対象に、それらのmRNAの日周リズムについてin vivoで検討したところ、有意な日周リズムが存在することが明らかとなった。次に時計遺伝子のmRNAおよびタンパクの日周リズムを測定したところ、両者の相互関連が示唆された。また、対象遺伝子の転写制御領域に着目し、データベースより時計関連遺伝子の結合配列の存在を明らかにした。これを検証する目的で、in vitroの系で、対象遺伝子の転写制御領域の遺伝子配列を、deletionおよびmutationすることで、時計遺伝子が転写に関与していることを明らかにした。さらに、高濃度の血清処理後、in vivoの日周リズムをin vitroで再現する系を構築し、抽出された転写促進因子および転写抑制因子をsiRNAによるRNA干渉法でknock downさせ、時計関連遺伝子がそれらの転写制御に関与していることを明らかにした。その後、再びin vivoの系で、クロマチン免疫沈降法を用い、in vitroで抽出された転写制御因子が、転写に関与していることを明らかにした。以上の結果から癌関連遺伝子および薬剤感受性規定遺伝子の転写制御に時計遺伝子が関わっていることが明らかとなり、今後の創薬および育薬研究への展開が期待される。

The aim of this study is to develop a new approach to cancer diagnosis based on the development of cancer related genes. Objective 1: Sensitivity of carcinogenic substances and anticancer agents and effects of carcinogens Reality 2: Explanation of Cancer-Related Gene Expression and Gene Susceptibility Regulation Gene Expression Regulatory Body. Objective 3: Evaluation of the correlation between time series and cancer related genes and susceptibility regulation genes. In the past year, the central government has implemented various measures to prevent cell damage, such as cancer related diseases and susceptibility regulation diseases. In addition, the research on the correlation between cancer related genes and susceptibility genes was carried out on February 2 and March 3 of this year. For example, the clock is different from the wild type. In fact, when the extracted cancer-related genes and drug-sensitivity regulatory genes are targeted, the daily expression of the extracted mRNA in vivo will be discussed, and it will be clear that the intentional daily expression will exist. In addition, the correlation between mRNA and protein was also detected. The existence of a combination of time-related genes is clearly identified in the context of the control domain of the corresponding gene The purpose of this document is to identify, in vitro, the location, deletion and mutation of the information in the domain of control, and the timing of the information in the domain of control In addition, after treatment with high serum concentrations, in vivo and in vitro replication, RNA interference methods to construct, extract, and suppress gene expression promoters and siRNA are described in detail below. After that, the immune sedimentation method was used in vivo, and the control factor was extracted in vitro. The above results indicate that the development of cancer-related gene and drug susceptibility regulation gene and drug control gene is expected.