疑似細胞膜を用いた免疫細胞活性化シグナル伝達の細胞内1分子イメージング定量解析

利用伪细胞膜进行免疫细胞激活信号转导的细胞内单分子成像定量分析

• 批准号: 20034058
• 负责人: 十川 久美子
• 金额: $ 4.1万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20034058/
• 关键词: 蛍光観察; 1分子イメージング; 免疫細胞; 抗原提示細胞; 免疫シグナル; 人工脂質二重膜

免疫細胞(T細胞)は、特異的抗原刺激に対応し、刺激の種類・強度依存的に不応答から活性化そして過剰活性化による細胞死まで多様な応答を示す。細胞問相互作用により提示される特異的抗原による活性化機構の解明には、刺激源である抗原提示細胞の模倣系を用いて刺激成分を制御することが有用な手段となる。抗原提示細胞由来のMHC一抗原ペプチド複合体、接着分子などを人工脂質二重膜に埋め込むことで、抗原提示細胞表面の模倣系を構築した。これにより、実際の細胞接触面でのイベントをガラス表面に再現できた。一方、免疫細胞活性化に有効な微弱刺激による応答は、個々のシグナル伝達蛋白質の1分子レベルでのリアルタイム観察および解析により詳細に調べることができる。我々の開発した蛍光1分子顕微鏡システムは、全反射照明法による細胞表面および薄層斜光照明法による細胞内部について低背景光の鮮明な画像を得る利点を有する。模擬抗原提示細胞系と蛍光1分子顕微鏡システムの組み合わせにより、刺激時の免疫受容体蛋白質およびシグナル伝達タンパク質の動的解析を行い、活性化初期過程において数十分子からなるTCR(T細胞受容体)マイクロクラスター形成が活性化に重要であることを示した。今回、人工脂質二重膜に補助刺激因子を追加し、動的解析を行ったところ、TCRシグナルと同様、補助因子シグナルについても同様の集積が見られ、時間と共に細胞内での集積部位が異なり、時間的空間的に制御されていることが分かった。

Immune cells (T cells) respond to specific antigen stimulation, and the type and intensity of stimulation do not respond to activation. The interaction between cells indicates the activation of specific antigens, the activation of mechanisms, the activation of stimuli, the activation of antigen mimicry, the activation of stimuli, and the activation of useful means. Antigens suggest the origin of MHC-antigen complexes, adhesion molecules, artificial lipid double membranes, antigen suggests the construction of mimicry systems on cell surfaces The cell contact surface is the same as the cell contact surface. One side, immune cell activation has weak stimulation, response, a molecular analysis of protein, a molecular analysis of protein. The development of molecular microscopes, total reflection illumination, low background light, and bright images of the interior of cells can be obtained by using the method of total reflection illumination and thin layer oblique illumination. In addition to the combination of simulated antigen prompt cell lines and fluorescent 1-molecule microscopes, the analysis of the movement of immune receptor proteins and siglial receptors during stimulation, and the importance of the formation of dozens of molecules of TCR(T cell receptor) receptors during the initial stage of activation. In this paper, artificial lipid double membrane subsidizes the addition of stimulating factors, the analysis of motion, the TCR, the similarity, the subsidization factor, the aggregation of the same species, the time, the aggregation of different sites in the cell, the control of time and space.

项目成果

Single molecule imaging and quantitative analysis in living cells.

活细胞中的单分子成像和定量分析。

• 发表时间: 2009
• 作者: Sakata-Sogawa;K.
• 通讯作者: K.

Single Molecule imaging by HILO microscopy in living cells and stochastic of multilple intermediates detected by single-molecule protein unfolding.

通过 HILO 显微镜在活细胞中进行单分子成像，并通过单分子蛋白质展开检测到多个中间体的随机成像。

• 发表时间: 2008
• 作者: M Ogawa;Y Harada;T Takamatsu;辻孝;Keiko Naruse;徳永万喜洋;辻孝;Tokunaga M.
• 通讯作者: Tokunaga M.

Spatiotemporal regulation of T cell co-stimulation by TCR-CD28 microclusters through PKC0 translocation

TCR-CD28微簇通过PKC0易位对T细胞共刺激的时空调节

• 发表时间: 2008
• 期刊: Immunity 29
• 作者: 森田梨津子;池田悦子;中尾一久;石田研太郎;仲村崇;小川美穂;室伏真由美;水野光政;山本照子;辻孝;Yokosuka T.
• 通讯作者: Yokosuka T.

細胞膜における免疫シグナル伝達分子相互作用の1分子イメージングと定量解析

细胞膜中免疫信号分子相互作用的单分子成像和定量分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 園山正史;菊川峰志 横山泰範;美宅成樹;十川久美子
• 通讯作者: 十川久美子

コロイド化学の基礎 第9章

胶体化学基础知识第 9 章

• 发表时间: 2009
• 作者: Gohda J;Irisawa M;Tanaka Y;Sato S;Ohtani K;Fujisawa J and Inoue J;徳永万喜洋
• 通讯作者: 徳永万喜洋