DNA損傷応答におけるヒストンH2AXダイナミクスのプロテオミクス解析

DNA 损伤反应中组蛋白 H2AX 动力学的蛋白质组学分析

• 批准号: 20055003
• 负责人: 井倉 毅
• 金额: $ 2.94万
• 依托单位: Kyoto University (2009)Tohoku University (2008)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20055003/
• 关键词: TIP60ヒストンアセチル化酵素; ヒストンH2AX; UBC13ユビキチン化酵素; ヒストンシャペロン; クロマチン構造変換; DNA損傷応答; 蛋白質複合体; プロテオミクス; ピストンH2AX; UBCI3ユビキチンヒ酵素; ヒストンシペロン; クロマチン構造亦; DNA有応答

転写、複製、修復などのDNA代謝に伴いクロマチンは動的に変化し、これらDNA代謝を制御する因子のDNAへの結合を容易にする。DNA損傷において、DNA損傷のセンサー蛋白質であるNBS1がクロマチンに結合し、リン酸化酵素ATMがNBS1に結合することにより、DNA損傷応答シグナルが誘導される。しかしながら如何なる機構でセンサー蛋白質NBS1が損傷クロマチンに誘導されるのかは明らかにされていなかった。我々は、DNA損傷に伴い、クロマチン構成蛋白質であるヒストンH2AXがクロマチンから放出されることを見出し、損傷クロマチンの構造変換の一端を明らかにした。放出されたH2AXを複合体として精製し、マス・スペクトロメトリー解析によりヒストンシャペロンFACTを新たな構成因子として同定した。そしてH2AXのクロマチンからの放出が、TIP60ヒストンアセチル化酵素とユビキチン化結合酵素UBC13との複合体とヒストンシャペロンFACTとの協調的な作用によりおこなわれることを明らかにした。さらに我々は、このヒストンH2AXのクロマチンからの放出が、センサー蛋白質であるNBS1の損傷クロマチンへの誘導に必要であることを、TIP60ノックダウン細胞およびH2AXのアセチル化部位を変異させた遺伝子を導入した細胞を用いた生化学的な解析とmicro-irradiationを用いたin vivo解析により示し、DNA損傷に伴うクロマチンの動的変化がセンサー蛋白質NBS1のクロマチンへの誘導に必要であることを示した。

It is easy to write, copy, and repair DNA metabolism and DNA metabolism, and it is easy to combine DNA metabolism with DNA metabolism and control factors. DNA damage, DNA damage, protein damage, NBS1 binding, DNA damage Acidification enzyme ATMがNBS1にbinding enzyme and DNA damage response enzyme inducer. How to damage the protein NBS1 of the body?クロマチンにinducing されるのかは明らかにされていなかった. My 々は, DNA damage に合い, クロマチン constitute protein であるヒストンH2AX がクロマThe チンから releases the されることを见出し, and damages the クロマチンのstructural changeのOne end を明らかにした. Release the H2AX complex of the H2AX complex, the refined solution, and the solution of the H2AX complex Analysis of the によりヒストンシャペロンFACTを新たな constituent factors として同定した.そしてH2AX のクロマチンからのreleaseが, TIP60 ヒストンアセチル化zyme とユビキチンchemical conjugation enzyme UB C13 との Complex とヒストンシャペロンFACT との coordinated な effect によりおこなわれることを明らかにした.さらに我々は、このヒストンH2AXのクロマチンからのreleaseが、センサーprotein Quality of NBS1 damage クロマチンへのinducing necessary であることを、TIP60ノックダウン Cell および H2AX のアセチル化 site を変different させた伝子を Introduction した Cell を な Analysis of いた Biochemistry とmicro-irradiation を Use いたin Vivo analysis and analysis, DNA damage and changes in DNA damage. NBS1 protein NBS1 is necessary for induction of NBS1 protein.

项目成果

Absence of Ku70 Gene Obliterates X-Ray-Induced lacZ Mutagenesis of Small Deletions in Mouse Tissues

• DOI: 10.1667/rr1283.1
• 发表时间: 2008-08
• 作者: Y. Uehara;H. Ikehata;J. Komura;A. Ito;Masaki Ogata;T. Itoh;R. Hirayama;Y. Furusawa;K. Ando;T. Paunesku;G. Woloschak;K. Komatsu;S. Matsuura;T. Ikura;K. Kamiya;T. Ono

ゲノムストレス応答と核内蛋白質の高次構造体構築

基因组应激反应和核蛋白的高阶结构构建

• 发表时间: 2009
• 期刊: 実験医学増刊号 Vol.27
• 作者: 岩永剛;ら;堤良平ら;深田優子ら;Niida H;Fujimoto Y;井倉正枝;Kitayama K;田代聡
• 通讯作者: 田代聡

Deubiquitylation of histone H2A activates transcriptional initiation via trans-histone cross-talk with H3K4 di- and trimethylation

• DOI: 10.1101/gad.1609708
• 发表时间: 2008-01-01
• 期刊: GENES & DEVELOPMENT
• 影响因子: 10.5
• 作者: Nakagawa, Takeya;Kajitani, Takuya;Ito, Takashi
• 通讯作者: Ito, Takashi

DNA損傷応答におけるクロマチン構造変換の分子機構とその役割

染色质结构转变的分子机制及其在DNA损伤反应中的作用

• 发表时间: 2009
• 作者: Dohi;Y;Kitayama K;井倉毅;井倉正枝;井倉毅;井倉毅;井倉毅;井倉毅;井倉毅
• 通讯作者: 井倉毅

Essential role of Tip60-dependent recruitment of ribonucleotide reductase at DNA damage sites in DNA repair during G1 phase

• DOI: 10.1101/gad.1863810
• 发表时间: 2010-02-15
• 期刊: GENES & DEVELOPMENT
• 影响因子: 10.5
• 作者: Niida, Hiroyuki;Katsuno, Yuko;Nakanishi, Makoto
• 通讯作者: Nakanishi, Makoto