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微生物における有用遺伝子の効率的発現

微生物中有用基因的高效表达

基本信息

批准号：
63616006
负责人：
中澤淳
金额：
$ 9.86万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63616006/
关键词：
微生物転写調節正の調節誘導合成シグマ因子シス作動性

项目摘要

遺伝子の転写調節については、従来大腸菌乳糖代謝系に代表されるように、転写開始を抑制するリプレッサーによる負の調節の図式が一般化していた。しかし、最近では動物遺伝子をはじめ、微生物の遺伝子においても、転写を促進するアクチベーター蛋白の存在が明らかになってきた。このような正の転写調節の分子機構が解明できると、これを利用した発現ベクターの作成への道も開かれ、有用遺伝子の効率的発現に応用することができるようになるものと思われる。本研究では、大腸菌リン酸代謝系のphoB蛋白、シュードモナスの芳香族化合物分解系のxylR蛋白、ColIbプラスミド複製開始におけるrepY因子などのアクチベーター蛋白をとりあげた。その中で、シュードモナスのxylR蛋白は次のような極めてユニークな性質をもつことが明らかになった。まず、転写を司るRNAポリメラーゼは、通常のシグマ因子(σ^<70>)ではなく、σ^<60>(NtrA蛋白)を使用する。そのため、プロモーターの塩基配列が、通常の-35、-10の共通配列とは全く異る、-24、-12の共通配列を利用する。次に、DNA上のxylR蛋白の結合領域は、転写開始点の150塩基対上流に、離れて存在し、遠隔作用によるシス作動性の活性化の様式をとる。さらに、xylR蛋白は、これまでにσ^<60>を使用することが明らかになっているNtrC蛋白、NifA蛋白との共通のアミノ酸配列をもつことから、蛋白質のこの領域がσ^<60>をもつRNAポリメラーゼと相互作用を営むことが考えられる。以上の成績から、xylR蛋白は作用点においてDNAの大きな構造変化を伴いつつ、転写の開始を促進するという可能性があり、この系が正の転写調節の分子機構解明に大いに役立つものであることがわかった。

The author of the については of the leftover child, the representative of the Escherichia coli lactose metabolism system, されるように,転WRITE BEGIN を Suppression するリプレッサーによるnegative のregulatory の図式が generalization していた.しかし, ではAnimal legacy 伝子をはじめ, Microorganism の人伝子においても、転WRITEをpromote the existence of the protein in the protein.このような正の転WRITING THE Molecular Mechanism of Regulation が Explain できると、これを Use した発行ベクターのCreate への道も开かれ, the effective use of the remaining 缝子のに応用することができるようになるものと思われる. In this study, the phoB protein of the coli acid metabolism system and the aromatic compound decomposition system of the シュードモナスのxylR Protein, ColIbプラスミドReplication startにおけるrepY factorなどのアクチベーターproteinをとりあげた.その中で、シュードモナスのxylR protein は时のような极めてユニークな properties をもつことが明らかになった.まず, 転写を斯るRNAポリメラーゼは, のシグマfactor (σ^<70>) ではなく, σ^<60>(NtrA protein) する.そのため, プロモーターの塩组arrayが, usual の-35, -10 ののとはくくる, -24, -12 の common array を utilization する. Second, the binding area of the xylR protein on DNA, the upper flow of 150 kilobases of the 転start point, the presence of isolation, the activation of the remote action, and the activation of the action.さらに, xylR protein は, これまでにσ^<60>を Use することが明らかになっているNtrC protein, NifA protein との公のAmin acid ligation をもつことから, protein のこの区がσ^<60>をもつRNAポリメラーゼとinteractionを営むことが卡えられる. The results of the above are the same, the xylR protein is the point of action, the DNA is large and the structure is changing, and the writing is starting and promoting The possibility of るというがあり, the この system of the positive の転write the molecular mechanism of the adjustment に大いに佫立つものであることがわかった.