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Candida酵母の炭素源分解に関与する一群の関連遺伝子の解析系の確立

念珠菌碳源分解相关基因群分析体系的建立

基本信息

批准号：
63616504
负责人：
高木正道
金额：
$ 0.9万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

n-アルカンの資化に関与する遺伝子の単離・解析のためには、C.maltosaの宿主-ベクター系を開発する必要がある。本酵母はプラスミドを持たないで、染色体からARS領域を単離した。ベクターのマーカーとしてはlau^-、his^-、ade^-変異株を得、それぞれ相補する野性型遺伝子を単離し、これらをARSを持つプラスミドに組込んだ。また、his^-ade^-の二重変異株を得、これとベクターを組合せて、少なくとも部分的には二倍体と考えられる本酵母のdauble-gane-disruptianによる遺伝子解析系を完成させた。現在宿主-ベクター系を用い以下の2つの研究を進行させている。(1)n-アルカン資化に関与する遺伝子の単離とその機能解析-n-アルカンとグルコースとを炭素源としてそれぞれ生育させた時の細胞からmRNA、cDNAを調整し、これを用いてgene libraryよりn-アルカン特異的に発現している遺伝子を単離する。また、部分的に決定されたn-アルカン資化に関与する酵素のアミノ酸配列を利用してDNAプローブを作り、遺伝子に単離する。現在までにいくつかの遺伝子(チトクロームp450を含む)が得られてており、その構造解析などが進行中である。(2)プロモーターの単離と異種遺伝子の発現系の構築--確立した宿主-ベクター系を用い、異種遺伝子の発現系を構築した。まずベクターにプロモーターとターミネーターとを連結し、その中間に異種遺伝子のクローン化部位を設置した。本系を用いた異種遺伝子発現を現在検討中である。

The capitalization of n-ALKEN is related to the isolation and analysis of genes, and the development of the host-host system of C.maltosa is necessary. The yeast is isolated from the chromosome. In addition, the wild type is isolated from the wild type, and the wild type is isolated from the wild type. The analysis system of the Dauble-Gane-Disruptian of the yeast was completed. Now Host-The following 2 studies are in progress. (1)n-The gene library is used to analyze the gene expression and function of the gene expression system. The gene library is used to analyze the gene expression system. Some of these decisions are related to the use of DNA for gene sequencing and gene sequencing. Now we are in the process of structural analysis. (2)Construction of Heterogeneous Gene Development System--Establishment of Host--Use of Heterogeneous Gene Development System To set up a link between the two different genes, This system is used in the development of heterogeneic genes.