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c-myc遺伝子の転写制御機構

c-myc基因的转录控制机制

基本信息

批准号：
63620517
负责人：
林健志
金额：
$ 1.02万
依托单位：
National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63620517/
关键词：
c-myc 転写制御再生肝無細胞転写系プロモーター Gフリーカセット

项目摘要

1.実験条件の検討:ラット正常および再生肝から核抽出液を調整した。また、テンプレートとして、ラットc-mycの主要なプロモーターであるP2から上流2kbを含み、かつ転写開始点下流にはGを持たない配列(Gフリーカセット)を合成して挿入したプラスミドを用いた。GTPを含まない反応液中で転写を行わせると、開始点から最初のGまでの長さのRNAが忠実な転写産物として観察される。c-mycプロモーターからの転写効率を種々の条件で検討した結果、テンプレート濃度が低い場合には、無関係なDNAを加えることにより、転写活性が上昇することが観察された。また、一定量以上のDNAは転写を阻害する。そこで以下の実験では至適DNA濃度で反応を行なった。アデノウィルスMLプロモーター、アルブミンプロモーターをそれぞれGFCにつないだプラスミドを作成し、これらと、c-mycプロモーターとの相対的転写活性を検討した。c-mycプロモーターはAdNLの約10分の1、アルブミンプロモーターより数倍強いことが判明した。肝臓中で、c-mycの転写がアルブミン遺伝子の転写より多いとは考えられないから、この反応系ではc-mycの転写抑制機構が失われているものと考えられる。2.c-myc上流の転写への影響:c-mycプロモーター上流を欠失させた種々のテンプレートの転写活性を検討した結果、P2のTATA配列上流、約60塩基のあたりに転写促進領域が存在することが示唆された。3.考察と展望:本実験で用いた無細胞転写系では、正常肝、再生肝でのc-myc転写活性に有意の差はみとめられなかったので、核抽出液の調整法を再検討する必要がある。また、上記転写促進領域に結合する因子を同定、精製することを試みる。

1. Review of the conditions: normal and regenerative liver extract adjustment P2: Upstream 2kb, including write start point, Downstream G: Keep it aligned (G: Open), and use it. GTP contains the initial RNA in the reaction solution and the initial RNA in the reaction solution. C-myc is the most effective way to increase the activity of DNA. DNA damage is prevented by more than a certain amount. The following DNA concentrations were found in the cells. The GFC has been working on the development of a variety of technologies, including the development of new technologies, the development of new technologies, and the development of new technologies. c-myc In the case of the liver, the c-myc is written in the same way as the c-myc is written in the same way. 2. The influence of c-myc upstream writing: c-myc upstream writing activity is discussed, and the TATA of P2 is arranged upstream, about 60%. 3. Review and prospect: It is necessary to reexamine the regulation method of c-myc gene activity in normal liver and regenerative liver. In addition, it is necessary to write down the factors that promote the integration of the two fields.