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外来遺伝子導入法を用いた高等植物の転写調節DNA領域の解析

外源基因导入法分析高等植物转录调控DNA区域

基本信息

批准号：
63622502
负责人：
内藤哲
金额：
$ 1.6万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

転写制御因子を遺伝学的に解析する系を確立するため、大豆の7s種子貯蔵タンパク質遺伝子をアラビドプシスに導入し、トランイジェニック植物を得た。7s貯蔵タンパク質を構成する3つのサブユニットの内、先ずβサブユニットをコードするゲノムDNAを導入した。得られたトランイジェニックアラビドプシスは種子の成熟後期に高いmRNAレベルを示し、既に報告したダイズやトランスジェニックペチュニアの場合と良く似た発現の時間経過を示した。このことは、種子貯蔵タンパク質の発現制御に種を超えた普遍性のあることを示している。次いで、α'サブユニット遺伝子の5'領域を切り出して、β-グルクロニターゼ(GUS)の構造遺伝子とつないでキメラ遺伝子を導入した。得られたトランスジェニックアラビドプシスの種子は高いGUS活性を示した。アラビドプシスの種子は1粒約20μgでしかないが、このトランスジェニックアラビドプシスの種子は1粒で検出限界の1,000倍以上の活性を示した。一方、葉では活性は検出されず、発現制御の特異性を保っていた。この種子を発芽させて得た双葉(8日目)てのGUS活性を測定したところ、1対の双葉は種子1粒の約1/3の活性を残していた。従って、このトランスジェニックアラビドプシスの種子に突然変異誘起処理を行い、2代目の種子を蒔いて得られる双葉1枚でGUS活性のスクリーニングを行うことにより、大豆種子貯蔵タンパク質遺伝子の発現制御に係わる変異を持ったアラビドプシスを分離することができると考えられる。

The analysis system of genetic control factors was established, and soybean seed storage was introduced into the plant. 7s storage structure is composed of three parts, namely, the first part and the second part. The results showed that the expression of mRNA in the late stage of seed maturation was higher than that in the late stage of seed maturation, and the expression of mRNA in the late stage of seed maturation was higher than that in the late stage of seed maturation. The seed storage system is universal. The 5'domain of α' The results showed that there was a high GUS activity in the seeds of the plant. The activity of each seed is 1,000 times higher than the limit of about 20μg. The activity of a leaf is not detected, and the specificity of the control system is maintained. The activity of GUS in the seeds of the two leaves (8 days old) was determined. About 1/3 of the activity in the seeds of the two leaves was determined. The seed of soybean seed was induced by sudden change in temperature, and the seed of the second generation was produced by one double-leaf. The GUS activity was induced by sudden change in temperature. The soybean seed storage system was controlled by sudden change in temperature, and the soybean seed was isolated.