分裂組織におけるメチオニン生合成制御の分子機構

分生组织中蛋氨酸生物合成控制的分子机制

• 批准号: 11163201
• 负责人: 内藤 哲
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11163201/
• 关键词: シロイヌナズナ; 突然変異株; シスタチオニンγ-シンターゼ; 培養細胞

遊離メチオニンを過剰に蓄積するシロイヌナズナのmtol変異株を用いた研究により,メチオイニンン生合成の鍵となる段階を触媒するシスタチオニンγ-シンターゼ(CGS)の遺伝子はmRNAの安定性のレベルでフィードバック制御を受けており,しかもこの制御にCGSタンパク質の第1エキソンポリペプチドが関与していることが明らかになった.35Sプロモーター〓CGS第1エキソン〓GUSを持つトランスジェニック・シロイヌナズナから液体培養カルスを誘導し,メチオニンの効果をmRNAレベルで調べた.その結果,野生型の第1エキソンを持つ株のGUSmRNAのレベルはメチオニン添加により減少したのに対して,mtol変異型の第1エキソンを持つ株では減少は見られなかった.これまでCGS第1エキソンの機能解析は一過的発現系におけるレポーター活性により行ってきたが,この結果は,CGS第1エキソンが実際にmRNAレベルでの制御に機能を持つことを示している.また,培養細胞ラインを用いた一過的発現系の確立を行った.野生型とmtol-1変異型のCGS第1エキソンについて,35Sプロモーター*CGS第1エキソン〓GUSをタバコBY2細胞に電気穿孔法により導入して一過的発現を調べたところ,シロイヌナズナの液体培養カルスを用いた場合と同様のメチオニン応答性を示した.この結果は,タバコBY2細胞が実験系として有望であることを示している.既にAgrobacteriumを用いて上記のDNAを導入した形質転換ラインを得ており,BY2に内在性のCGS遺伝子と導入遺伝子についてCGSmRNAの安定性の解析を行っている.

The stability of CGS mRNA is controlled by the reaction of CGS gene to the synthesis of CGS gene and the reaction of CGS gene to the synthesis of CGS gene. CGS 1st solution GUS 1st solution GUS 1st solution As a result, the wild type of GUS mRNA in the first phase of the plant was reduced by the addition of GUS mRNA in the first phase of the plant. The analysis of CGS 1st level function shows that CGS 1st level function is related to mRNA expression and control function. To establish a new development system for cultured cells. CGS 1st generation of wild-type mtol-1 variant is regulated by electroporation in BY2 cells, and CGS 1st generation is regulated by electroporation in liquid culture medium. As a result, BY2 cells are expected to grow rapidly. Both Agrobacteria and DNA are introduced into the genome, and the stability of CGSmRNA is analyzed.

项目成果

Yukako Chiba: "Evidence for autoregulation of cystathionine g-synthase mRNA stability in Arabidopsis"Science. 286-5443. 1371-1374 (1999)

Yukako Chiba：“拟南芥中胱硫醚 g-合酶 mRNA 稳定性自动调节的证据”《科学》。

Derek Bartlem: "A mutation in the threonine synthase gene in the Arabidopsis mto2 mutant results in an over-accumulation of soluble methionine"Plant Physiology. in press. (2000)

Derek Bartlem：“拟南芥 mto2 突变体中苏氨酸合酶基因的突变导致可溶性蛋氨酸过度积累”《植物生理学》。

Eiji Nambara: "The role of ABI3 and FUS3 Loci in Arabidopsis thaliana on phase transition from late embryo development to germination"Developmental Biolology. in press. (2000)

Eiji Nambara：“拟南芥中 ABI3 和 FUS3 位点对从胚胎发育晚期到萌发的相变的作用”发育生物学。