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外来遺伝子導入法を用いた高等植物の転写調節DNA領域の解析

外源基因导入法分析高等植物转录调控DNA区域

基本信息

批准号：
62622003
负责人：
内藤哲
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

高等植物に於ける転写制御因子の研究は, 生化学的研究が精力的に進められている反面, 遺伝学的解析はその手法すら確立していないのが現状である. 本研究は植物における遺伝学的解析の系として有用なシロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)を用いて, 転写制御因子の変異株を解析する系の開発をめざすものである.解析のモデル系として大豆種子の7S貯蔵蛋白質(β-コングリシニン)遺伝子を選んだ. β-コングリシニンのα′-サブユニット遺伝子を転車開始点との最初のATGコンドとの間で切断し, 約1Kbから成る転写調制領域のDNAを単離した. これを大腸菌のβ-グルクロニダーゼの構造遺伝子部分と融合させ, キメラ遺伝子を作制した. このキメラ遺伝子をTiプラスミドを用いてシロイヌナズナに導入した. 得られた再生植物体では. 大豆のβ-コングリシニンプロモーターの制御下にβ-グルクロニダーゼを発現すると期待される. 従って, このトランスジェニックシロイヌナズナを用いてβ-グルクロニダーゼ活性を指標としたスクリーニングを行うことにより, β-コングリシニンプロモーターの転写活性の変化した変異株が分離できる.β-グルクロニダーゼは, 高等植物の系で実用化されているレポーター遺伝子としては最も使いやすいもののひとつであるが, 変異株のスクリーニングのためには栄養要求性マーカーの方がより有利である. シロイヌナズナではチアミン要求性変異株が知られている. チアミン要求性変異株のひとつについて調べた結果, チアミンりん酸ピロホスホリラーゼ活性が欠損していることが明らかになった. 大腸菌では, この酵素はthiB遺伝子にコードさている. 大腸菌のthiA B遺伝子を, このチアミン要求性シロイヌナズナ変異株に導入した結果, チアミン要求性が相補された.

The research on control factors of higher plants is the progress of biochemical research, and the analysis of genetics is the establishment of the present situation. This study is aimed at analyzing the genetic system of plants and developing the genetic analysis system of control factors. Analysis of 7S Storage Protein (β-C_2C The β-terminal sequence of the α′-terminal sequence of the DNA sequence is separated from the DNA sequence of the modulation domain by about 1Kb between the initial ATG terminal and the starting point of the DNA sequence. The β-glucurons of E. coli and the structural genes of E. coli are partially fused, and the genes are controlled. This is the first time I've ever seen a woman who's been in love with me. Regenerated plant bodies are obtained. Beta-glucuronidase is expected to occur under the control of soybean beta-glucuronidase. In addition, the activity of β-cyclodextrin is an indicator of activity, and the activity of β-cyclodextrin is an indicator of activity. The higher plants are used in the cultivation of plants, and the higher plants are used in the cultivation of plants. A variety of plant species are required to be identified. The result of the adjustment is that the activity of the enzyme is insufficient. E. coli is the most common form of E. coli. E. coli and thiA B gene expression, the requirements of the introduction of foreign strains, the requirements of the introduction of complementary.