Tissue Factorの生成・発現機構およびVII因子との反応機序

组织因子的产生/表达机制以及与因子VII的反应机制

• 批准号: 63637504
• 负责人: 中村 伸
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63637504/
• 关键词: Tissue Factor; Factor-VII; 白血病細胞; 分化; 外因系凝固反応; 血液凝固開始機序

本年度はTissue factor(TF)の生成・発現の調節機序を明らかにする一環として、ヒト白血病由来細胞株におけるTFm^-RNA及び細胞表面のTF抗原発現性について、分化誘導因子の影響を検討した。ホルボールエステル性分化因子のTPA(10ng/ml)は、分化状態の異なる3種のマクロファージ系細胞株(ML-3、THP-1、RET-1)のいずれに対しても、TFm^-RNA及び細胞表面TF抗原の発現量を2〜4倍増大させた。一方、リンホカイン性分化因子のINF-γ(10^3u/ml)は、いずれの細胞株に対しても、双方の発現量を1/4〜1/10に低下させた。従って、白血病細胞におけるTFm^-RNA及び細胞表面TF抗原の発現性は、TPAによってup-regulationされ、一方、INF-γによってdown-regulationされることが明らかになった。更に、固着性細胞株J-82を用い、細胞表面TFとVII因子間相互作用を解析した。^<125>I-ラベルVII子とJ-82を10mMCa^<2+>共存下incubateすると、J-82細胞表面でのTF-VII因子複合体形成が認められた。この時EDTA添加によって、結合したVII因子は可逆的にJ-82表面上のTFから解離した。興味深いのは、J-82TFに結合したVII因子は、Xa様プロテアーゼによって、限定分解を受け、heavy及びlight鎖に切断されていた。このプロテアーゼは、leupeptin、antitrypsin-IIIに感受性であった。また、細胞表層で生じたTF-VII複合体のエンドサイトシスと引き続く細胞内でのdegradation等は認められなかった。以上の結果より、J-82細胞表面でのTF-VII因子相互作用として、TF-VII複合体形成及びXa様活性化因子による複合体VIIVII因子の活性化によるVIIa因子の生成が示唆された。

This year は Tissue factor (TF), の generating sequence を 発 now の conditioner, Ming ら か に す る link と し て, ヒ origin ト leukemia cell lines に お け る TFm ^ - RNA and び cell surface の TF antigen 発 に つ い の て, induction factors affect を beg し 検 た. ホ ル ボ ー ル エ ス テ ル sexual differentiation factor の TPA (10 ng/ml) は, differentiated state の different な る three の マ ク ロ フ ァ ー ジ system cell lines (ml - 3, THP 1, RET - 1) の い ず れ に し seaborne て も, TFm ^ - RNA and び cell surface antigen of TF の 発 を 2 ~ 4 times as much now raised large さ せ た. Party, リ ン ホ カ イ ン sexual differentiation factor の INF - gamma (10 ^ 3 u/ml) は, い ず れ の cell lines に し seaborne て も, both sides の 発 now low quantity を 1/4 ~ 1/10 に さ せ た. 従 っ て, leukemia cells に お け る TFm ^ - RNA and TF び cell surface antigen の 発 now は, TPA に よ っ て up - regulation さ れ, one party, the INF - gamma に よ っ て down - regulation さ れ る こ と が Ming ら か に な っ た. Further に, the adherent cell line J-82を was analyzed by に, and the interaction between TFと and VII factors on the cell surface was を. ^ < 125 > I - ラ ベ ル VII son と J - 82 を 10 mmca ^ 2 + < > under the coexistence incubate す る と, J - 82 cell surface で の TF - VII factor complex formation が recognize め ら れ た. When the EDTA added によって and combined with <s:1> たVII factor <s:1> reversible にJ-82 surface <s:1> TF ら ら dissociation <s:1> た. Takes deep い の は, J - 82 tf に combining し た factor VII は, Xa others プ ロ テ ア ー ゼ に よ っ て, qualified decomposition を け, heavy and び light lock に cut さ れ て い た. <s:1> プロテア プロテア ゼ ゼ, leupeptin, antitrypsin-IIIに sensitivity であった. ま た, cell surface で じ た TF - VII complex の エ ン ド サ イ ト シ ス と lead き 続 く intracellular で の degradation such as は recognize め ら れ な か っ た. の above results よ り, J - 82 cell surface で の TF - VII factor interaction と し て, TF - VII complex formation and び Xa others activation factor に よ る complex VIIVII factor の activeness に よ る VIIa factor の generated が in stopping さ れ た.

项目成果

Akihiro YAMADA et al: Eur.J.Biochem.175. 213-220 (1988)

Akihiro YAMADA 等人：Eur.J.Biochem.175。

中村伸: 日本の科学者. 24. 51-52 (1989)

Shin Nakamura：日本科学家。24. 51-52 (1989)

中村伸: 血液と脈管. 19. 450 (1988)

Shin Nakamura：血液和血管。19. 450 (1988)

中村伸: 血栓形成と血栓溶解. (1989)

Shin Nakamura：血栓形成和溶栓（1989）。

Shin NAKAMURA: FEBS Lett.

中村信：FEBS Lett。