生殖母体表面蛋白を用いた新規三日熱マラリア伝搬阻止ワクチンの作成

利用配子体表面蛋白研制一种新疫苗来阻止间日疟原虫疟疾的传播

• 批准号: 15019072
• 负责人: 坪井 敬文
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019072/
• 关键词: 三日熱マラリア; 伝播阻止ワクチン; DNAワクチン; 生殖母体; 遺伝子多型; 国際研究者交流; タイ

生殖母体表面蛋白Pvs47及びPvs48を抗原として用いた伝搬阻止ワクチンが新たに作成できれば、現在開発中のオーキネート表面蛋白を抗原とした三日熱マラリア伝搬阻止ワクチンとは作用点が異なるため、Pvs25ワクチンと併用時の相乗/相加効果が期待でき、また、免疫後原虫に感染した時に抗体価のブーストが期待できる。1.DNA免疫法を用いた特異抗血清の作成三日熱マラリア原虫生殖母体表面蛋白Pvs47及びPvs48はシステインに富む3つのドメインを持つ。そこでドメイン全長、又は最後の「6Cys」のみを、DNAワクチン用プラスミドVR1020に組み込んだ。これらのプラスミドをマウス、及びラットの耳介皮内に注射してDNA免疫を行い、Pvs47及びPvs48の立体構造を認識する抗体を誘導することを試みた。その際、Alumアジュバント、またはDNAワクチン用に開発されたアジュバントVaxfectinを用いて免疫を行った。その結果、Pvs47及びPvs48いずれも全長を含むプラスミドにおいて昨年度のpJW4304を用いた免疫の際よりも高い抗体価がマウスに誘導された。これらの抗血清と三日熱マラリア原虫生殖母体を抗原に用いた間接蛍光抗体法により、Pvs48は原虫表面に、Pvs47は原虫細胞質内にも発現していることが明らかとなった。2.Pvs47及びPvs48の遺伝子多型の解析タイ、バヌアツ、コロンビアのマラリア流行地において得られた23分離株の解析から、Pvs47では3カ所の同義置換、15カ所の非同義置換が認められ、非同義置換は前半部の6Cys-2Cysの部分に集中していた。Pvs48では4カ所の同義置換、7カ所の非同義置換が認められ、非同義置換はC末端に近い6Cysの部分に比較的多数認められた。また、Pvs47、Pvs48いずれも多型に地域的偏りが認められた。これらのデータの集団遺伝学的解析から、少なくともPvs47は、何らかの選択圧によって多型が生じていることが示唆された。また、Pvs48においても、最後の「6Cys」ドメインは選択圧にさらされていることが示唆された。

Reproductive maternal surface proteins Pvs47 and Pvs48 are used to prevent infection, and are now being developed to prevent infection. 1. DNA immunization method to prepare specific antiserum for three day fever protozoan reproductive maternal surface protein Pvs47 and Pvs48 The full length of the DNA file, the final "6Cys" file, and the final "VR1020" file are included. DNA immunization, Pvs47 and Pvs48 stereotyping In the meantime, Alum has been released, and the development of Vaxfectin in the use of DNA has been carried out. Pvs. 47 and Pvs. 48 were found to contain the full length of pJW4304, which was used to induce pJW4304. The antiserum was detected in the cytoplasm of protozoa by indirect light antibody method. 2. The analysis of Pvs47 and Pvs48 genetic polymorphism was carried out in the epidemic area. The analysis of Pvs47 and Pvs48 genetic polymorphism was carried out in the epidemic area. The analysis of Pvs47 and Pvs48 genetic polymorphism was carried out in the epidemic area. The analysis of Pvs47 and Pvs48 genetic polymorphism was carried out in the epidemic area. Pvs48 4 Pvs. 47, Pvs. 48, Pvs. 49, Pvs. 48, Pvs. 49, Pvs. 4 The analysis of this group of genes is based on the following: Pvs48, Pvs48, Pvs4

项目成果

Sattabongkot J.et al.: "Blocking of transmission to mosquitoes by antibody to Plasmodium vivax malaria vaccine candidates Pvs25 And Pvs28 despite antigenic polymorphism in field solates."American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. 69. 536-541 (2003

Sattabongkot J.等人：“尽管野外溶胶存在抗原多态性，但间日疟原虫疟疾候选疫苗 Pvs25 和 Pvs28 的抗体仍可阻断向蚊子的传播。”《美国热带医学与卫生杂志》。

Tsuboi T.et al.: "Gene structure and ookinete expression of the chitinase genes of Plasmodium vivax and Plasmodium yoelii."Molecular and Biochemical Parasitology. 130. 51-54 (2003)

Tsuboi T.等人：“间日疟原虫和约氏疟原虫的几丁质酶基因的基因结构和动动表达。”分子和生化寄生虫学。

Arakawa T.et al.: "Serum antibodies induced by intranasal immunization of mice with Plasmodium vivax Pvs25 co-administered with cholera toxin completely block parasite transmission to mosquitoes."Vaccine. 21. 3143-3148 (2003)

Arakawa T.等人：“用间日疟原虫Pvs25与霍乱毒素共同给予小鼠鼻内免疫诱导的血清抗体完全阻止了寄生虫向蚊子的传播。”疫苗。