ゲノムワイドな新規マラリアワクチン抗原探索ストラテジー

全基因组新型疟疾疫苗抗原发现策略

• 批准号: 19041053
• 负责人: 坪井 敬文
• 金额: $ 9.22万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19041053/
• 关键词: マラリア; ワクチン; 感染症; バイオテクノロジー; ゲノム

熱帯熱マラリアゲノム情報が明らかとなった今、マラリア流行地の成人に防御抗体を誘導する原虫抗原を網羅的に同定することができれば、新規マラリアワクチン開発の突破口となると考えられている。しかし、大腸菌等既存の方法では熱帯熱マラリア原虫組換えタンパク質の網羅的な合成は非常に困難であったため、そのような試みはこれまで全く実施されてこなかった。そこで申請者らは、これまでの研究で原虫の組換えタンパク質合成への有用性が確認されていたコムギ胚芽無細胞タンパク質合成法を用いて、メロゾイト期の完全長cDNAライブラリーからプロテインアレイを作製し、少量のマラリア流行地住民血清で実施可能なハイスループットなワクチン候補抗原スクリーニング手法を開発することを目的に本研究を実施した。1. コムギ胚芽無細胞系を用いたハイスループットなビオチン化プロテインアレイの作製メロゾイト期原虫のプロテインアレイを作製するため、前年度に作製したcDNAクローンから、コムギ無細胞タンパク質合成法を改変してビオチン化組換えタンパク質をハイスループットに合成出来る系を用いて、ビオチン化組換えタンパク質の合成を行い、熱帯熱マラリア原虫メロゾイト期のタンパク質約100種類以上小スケールで合成した。2. アルファ・スクリーン法を用いた新規メロゾイト抗原のスクリーニング昨年度に確立した高感度、小スケール、ハイスループットな抗原抗体反応測定系を用いて、上記メロゾイト期タンパク質100種類以上と、マラリア免疫血清約20人分を用いて、新規抗原のスクリーニングを行った。その結果、多くのマラリア免疫血清と反応する抗原タンパク質を同定することに成功した。

The information of the epidemic area and the prevention of protozoan antigen were analyzed. It is very difficult to synthesize the existing methods such as heat transfer, protozoa formation and so on. The applicant's research confirmed the usefulness of the protozoan assembly and protein synthesis method, and confirmed the use of the cell-free protein synthesis method in the embryo. A small amount of endemic human serum can be used to develop candidate antigens. 1. The cell free line of embryo was synthesized by the method of cell-free synthesis. The system was synthesized by the method of cell-free synthesis. The temperature of the heat wave is high, and the temperature of the heat wave is high. 2. The new method of antigen detection was established last year with high sensitivity, small sensitivity and high sensitivity. The anti-antigen antibody detection system was used for more than 100 types of anti-antigen serum and about 20 people. The new method of antigen detection was used. The results showed that there was no significant difference between the two groups.

项目成果

Wheat germ cell-free system : A breakthrough in malaria vaccine candidate discovery

小麦胚芽无细胞系统：疟疾候选疫苗发现的突破

• 发表时间: 2008
• 作者: Feng;G・T;Kodama・X;Chen・K;Okada・T;Honda;Iriko H;Tsuboi T;Yano K;Mudeppa DG;Ghoneim A;Han ET;Tsuboi T
• 通讯作者: Tsuboi T

Diversity and evolution of the rhophl/clag multigene family of Plasmodium falci parum.

镰状疟原虫 rhophl/clag 多基因家族的多样性和进化。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Mol Biochem Parasitol. 158
• 作者: Iriko H;Kaneko O;Otsuki H;Tsuboi T;Su XZ;Tanabe K;Torii M.
• 通讯作者: Torii M.

The Plasmodium falciparum RhopH2 promoter and first 24 amino acids are sufficient to target proteins to the rhoptries

• DOI: 10.1016/j.parint.2006.11.001
• 发表时间: 2007-03-01
• 期刊: PARASITOLOGY INTERNATIONAL
• 影响因子: 1.9
• 作者: Ghoneim, Ahmed;Kaneko, Osamu;Torii, Motomi
• 通讯作者: Torii, Motomi

Detection of four Plasmodium species by genus- and species-specific loop-mediated isothermal amplification for clinical diagnosis

• DOI: 10.1128/jcm.02117-06
• 发表时间: 2007-08-01
• 期刊: JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY
• 影响因子: 9.4
• 作者: Han, Eun-Taek;Watanabe, Risa;Tsuboi, Takafumi
• 通讯作者: Tsuboi, Takafumi

Novel sporozoite antigen discovery oi Plasmodium falciparum screened using human lmmunesera.

使用人类免疫血清筛选恶性疟原虫的新子孢子抗原的发现。

• 发表时间: 2007
• 作者: Feng;G・T;Kodama・X;Chen・K;Okada・T;Honda;Iriko H;Tsuboi T;Yano K;Mudeppa DG;Ghoneim A;Han ET;Tsuboi T;Tsuboi T
• 通讯作者: Tsuboi T