病原微生物が発現する宿主細胞認識分子のハイスループットな同定法の開発

病原微生物表达的宿主细胞识别分子高通量鉴定方法的建立

• 批准号: 17659121
• 负责人: 坪井 敬文
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659121/
• 关键词: マラリア; 微生物; 感染症; バイオテクノロジー; 蛋白質; 無細胞タンパク質合成

近年、多くの病原微生物のゲノム塩基配列が決定されているが、タンパク質の機能に関しては未だに得られる情報は少ない。核酸代謝・アミノ酸代謝といった生命現象に普遍的な分子は、生物全般で保存されており解析も比較的容易であるが、病原微生物の病原性に関与する分子、中でも感染の成立時に働く宿主細胞認識分子は病原微生物に固有のものが多く、ワクチンや創薬の標的であるにもかかわらず研究が遅れている。そこで我々は、病原微生物の宿主細胞認識分子をゲノムワイドに同定する手法の開発を目的として本研究を開始した。昨年度は、複雑な生活環を持ち多くの宿主細胞認識分子を持つと考えられる熱帯熱マラリア原虫の遺伝子約400個をモデルとして、コムギ無細胞タンパク質合成法を応用することにより、それらの約70%をGFP融合タンパク質として発現できた。本年度は、その原虫組換えタンパク質のレセプターとなるヒト赤血球膜ベジクルの作製を試みたが、均一なベジクルの作製は困難であった。そこで一分子蛍光分析システムを応用したレセプター・リガンドの同定の一例として、マラリア患者血清を用いた抗原抗体反応の測定を試みた。その結果、上記GFP融合原虫タンパク質の内約100種類と、患者血清を用いて検討した結果、3種類の原虫タンパク質がヒト血清中の抗体と反応し、抗原性を有していることが明らかとなった。したがって、本法は病原微生物と宿主分子間の結合をハイスループットに同定できる手法となりうることが示唆された。

In recent years, there has been a great deal of information about the necessary gene sequences of pathogenic microorganisms, which determines the functions of these organisms. Nucleic acid metabolism, acid metabolism and other biological phenomena are common molecules, organisms are generally preserved, and easier to analyze, pathogenic microorganisms are pathogenic molecules, and host cells recognize molecules inherent in pathogenic microorganisms when infection occurs. This is the beginning of the study on the development of molecular recognition techniques for pathogenic microorganisms. In the past year, the host cell recognition molecule of the complex life cycle has been detected. About 400 of the host cells have been detected. About 70% of the GFP fusion proteins have been detected by cell-free protein synthesis. This year, the company's protozoan composition is difficult to change, and the red blood cell membrane is difficult to control. This is an example of the use of a molecular fluorescence analysis system to determine the same antigen and antibody responses in sera from patients with malaria. The results showed that there were about 100 kinds of GFP fusion protozoa in the serum, and the antibody in the serum of 3 kinds of protozoa was anti-oncogenic. This method is used to detect the interaction between host molecules and pathogenic microorganisms.

项目成果

The wheat germ cell-free expression system : Methods for high-throughput materialization of genetic information.

小麦胚芽无细胞表达系统：遗传信息高通量具体化的方法。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Methods in Molecular Biology 310
• 作者: Toyooka;K.;et al.;Kaneko O;Yano K;Kaneko 0;Yano K;Arakawa T;Sawasaki T
• 通讯作者: Sawasaki T

Apical expression of three RhopH1/Clag proteins as components of the Plasmodium falciparum RhopH complex

• DOI: 10.1016/j.molbiopara.2005.05.003
• 发表时间: 2005-09-01
• 期刊: MOLECULAR AND BIOCHEMICAL PARASITOLOGY
• 影响因子: 1.5
• 作者: Kaneko, O;Lim, BYSY;Torii, M
• 通讯作者: Torii, M

Nasal immunization with a malaria transmission-blocking vaccine candidate, Pfs25, induces complete protective immunity in mice against field isolates of Plasmodium falciparum

• DOI: 10.1128/iai.73.11.7375-7380.2005
• 发表时间: 2005-11-01
• 期刊: INFECTION AND IMMUNITY
• 影响因子: 3.1
• 作者: Arakawa, T;Komesu, A;Tsuboi, T
• 通讯作者: Tsuboi, T

Reemerging vivax malaria: changing patterns of annual incidence and control programs in the Republic of Korea

• DOI: 10.3347/kjp.2006.44.4.285
• 发表时间: 2006-12-01
• 期刊: Korean Journal of Parasitology
• 作者: Han, Eun-Taek;Lee, Duk-Hyoung;Chai, Jong-Yil
• 通讯作者: Chai, Jong-Yil

The Plasmodium vivax homolog of the ookinete adhesive micronemal protein, CTRP

• DOI: 10.1016/j.parint.2006.04.003
• 发表时间: 2006-09-01
• 期刊: PARASITOLOGY INTERNATIONAL
• 影响因子: 1.9
• 作者: Kaneko, Osamu;Templeton, Thomas J.;Tsuboi, Takafumi
• 通讯作者: Tsuboi, Takafumi