プリオン病感染因子の本体と複製分子機構の解明

朊病毒病传染因子主体及复制分子机制的阐明

• 批准号: 15019079
• 负责人: 片峰 茂
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019079/
• 关键词: プリオン病; プリオン株; プリオン蛋白; 変異体; 構造変換; 培養細胞

プリオン株の分子機構解明に向けて、種々のPrP変異体のPrP^<Sc>への変換効率と、正常型プリオン蛋白(PrP^C)のPrP^<Sc>への変換に及ぼす各変異体の抑制作用(Dominant-negative効果)について、Chandler株あるいは22L株感染N2a58細胞(Ch-N2a58,22L-N2a58)の間で比較検討した。内在性マウスPrPを認識しない3F4抗体のエピトープタグを挿入したMHM2-PrPの発現ベクターを上記細胞に遺伝子導入した。3F4-PrPタグを有する,6種のマウスPrP変異体(Q218K,Q218E,Q97R,Q167R,Q171R,Q185R)も同時に作製し、変異体それ自身のPrP^<Sc>への変換を見る場合は単独で,MHM2-PrPのPrP^<Sc>への変換に対するDominant-negative効果をみる場合はMHM2-PrPと同時に遺伝子導入した。(1)MHM2-PrPはCh- and 22L-N2a58細胞内でPrPScに同等レベルに変換されたが、Q218E,Q218K,Q97R,Q167R,Q171R変異PrPは両株いずれによってもPrP^<Sc>に変換されなかった。一方、Q185Rは22LではPrP^<Sc>に変換されないが,Chandler感染細胞内では変換された。(2)Q218KはCh-N2a58細胞ではMNM2-PrPのPrP^<Sc>変換に対して強いdominant-negative効果を示したが,22L-N2a58細胞ではほとんど効果を示さなかった。一方、Q97R,Q167R,Q171Rは両プリオン株に対して同等のDominant-negative効果を示した。Q185RのPrP^<Sc>への変換効率とQ218KのDominant-negative効果の2つの指標において、Chandlerと22L両株間の顕著な違いが判明した。

The molecular mechanism of PrP gene expression in <Sc><Sc>N2a58 cells (Ch-N2a58, 22L-N2a58) was studied by comparing the molecular mechanism of PrP gene expression in N2a58 cells (Ch-N2a58, 22L-N2a58) with that of Chandler strain (Ch-N2a58, 22L-N2a58). Inherent recognition of PrP 3F4 antibody and expression of MHM2-PrP 3F4-PrP conversion has six different PrP variants (Q218K, Q218E, Q97R, Q167R, Q171R, Q185R) that can be simultaneously controlled and converted into their own <Sc>PrP variants. In this case, MHM2-PrP conversion has a <Sc>Dominant-negative effect. In this case, MHM2-PrP conversion can be simultaneously controlled. (1) MHM2-PrP is the same as PrPSc in Ch- and 22L-N2a58 cells, Q218E, Q218K, Q97R, Q167R, Q171R and PrP is the same as PrP in Ch-and 22L-N2a58 cells<Sc>. One side, Q185R 22L<Sc>(2) Q218K cell line Ch-N2a58 cells showed strong dominant-negative effect on MNM2-PrP and PrP<Sc>, while 22L-N2a58 cells showed strong dominant-negative effect on MNM2-PrP and PrP. One side, Q97R, Q167R, Q171R are shown to be equivalent Dominant-negative effects. Q185R's PrP^<Sc>^conversion efficiency and Q218K's Dominant-negative effect are identified by two indicators, Chandler and 22L.

项目成果

Atarashi R et al.: "Deletion of N-terminal residues 23-88 from prion protein (PrP) abrogates the potential to rescue PrP-deficient mice from PrP-like protein/doppel-induced Neurodegeneration"J Biol Chem.. 278・31. 28944-28949 (2003)

Atarashi R 等人：“从朊病毒蛋白 (PrP) 中删除 N 末端残基 23-88 消除了从 PrP 样蛋白/多普勒诱导的神经变性中拯救 PrP 缺陷小鼠的潜力”J Biol Chem.. 278・31 .28944-28949 (2003)

Watarai M et al.: "Cellular prion protein promotes Brucella infection into macrophages"J Exp Med.. 198・1. 5-17 (2003)

Watarai M等：“细胞朊病毒蛋白促进布鲁氏菌感染巨噬细胞” J Exp Med. 198・1 (2003)。

Yukitake M et al.: "EAAT4 mRNA expression is preserved in the cerebellum of prion protein-deficient mice"Neurosci Lett. 352・3. 171-174 (2003)

Yukitake M 等人：“朊病毒蛋白缺陷小鼠的小脑中保留了 EAAT4 mRNA 表达” Neurosci Lett 352·3 (2003)。