プリオン病感染因子の本体と複製分子機構の解明

朊病毒病传染因子主体及复制分子机制的阐明

• 批准号: 14021093
• 负责人: 片峰 茂
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021093/
• 关键词: プリオン病; プリオン蛋白; 培養神経細胞; プリオン株

マウス脳で継代された生物学的個性(発症までの潜伏期、症状、病理変化)の異なる3プリオン株(Fukuoka-1,22L, Chandler)を2種の培養細胞株(1C11,GT1-7)に感染・増殖させ、培養細胞中でも株の個性が維持されるか否かを、ddyマウス脳に感染細胞抽出液を接種することにより検討した。その結果、潜伏期、症状、病理変化の全ての指標で株の生物学的個性は培養細胞中でも維持され、株の個性は宿主因子ではなく病原体に規定されることが明らかとなった。培養細胞感染のプリオン感染モデルとしての有用性がさらに明確となったといえる。一方、電気泳動上の移動度や糖鎖付加パターンを指標とした蓄積PrP^<Sc>の立体構造は、同一プリオン株であっても感染脳組織と培養細胞中では異なり、宿主因子に大きく影響されることが示唆された。即ち、株の特性を規定するPrP^<Sc>の立体構造以外の因子の存在が示唆され、感染因子プリオンがPrP^<Sc>分子のみによって構成されるとする「プリオン仮説」では説明し難い結果となった。また、我々が樹立した感染細胞では、培養上清中にあきらかに感染因子が存在する。種々の限外ろ過膜を用いた培養上清濃縮実験では、100KDa以上の分画に感染性が濃縮された。また超遠心分離法を用いた検討では100,000xgにて感染因子を沈殿させ得ることがわかった。ddYマウスを用いて感染価を求めると少なくとも10^5LD_<50>/mlの感染価が上清中に存在していることがわかった。

マ ウ ス 脳 で 継 generation さ れ た biology character (発 ま で の incubation period, symptoms, pathological variations) の different な る 3 プ リ オ ン strains (Fukuoka - 1, 2 L, Chandler) two の を culture cell lines (1 c11, GT1-7) に infection, raised colonization さ せ, cultivating cells で も strains の personality が maintain さ れ る か no か を, ddy マ ウ ス 脳 に infected cell extract を vaccination す る こ と に よ り beg し 検 た. そ の results, the incubation period, symptoms, pathological variations の て の index で の biology character は strains cultured cells in で も maintain さ れ, plant の は host personality factor で は な く pathogens に rules さ れ る こ と が Ming ら か と な っ た. Infection of cultured cells て プリ て infectious モデ と と て て the usefulness of がさらに is clear となったと える える える. One party, the electric 気 swimming on the degree of の mobile や sugar lock pay パ タ ー ン を index と し た accumulation PrP ^ < > Sc の three-dimensional structure は, same プ リ オ ン strains で あ っ て も 脳 と tissue cultured cells in で は different な り, host factors に き く influence さ れ る こ と が in stopping さ れ た. Namely ち, plant の を rules す る PrP ^ < > Sc の exist outside の three-dimensional structure factor の が sucking in さ れ, infection factors プ リ オ ン が PrP ^ < > Sc molecular の み に よ っ て constitute さ れ る と す る "プ リ オ ン 仮 said" で は illustrate と し difficult い results な っ た. ま た, I 々 が set し た infected cells で は, culture supernatant of に あ き ら か に infection factors が す る. Strain 々 out-of-limit ろ transmembrane を and concentrate the supernatant with <s:1> た for laboratory で and <s:1> subdivide over 100KDa に for infectious が concentration された. を use い ま た buzzer-beaters heart separation た beg で 検 は 100000 xg に て infection factor を Shen Dian さ せ must る こ と が わ か っ た. DdY マ ウ ス を with い て infection 価 を o め る と less な く と も 10 ^ 5 ld_ 50 > < / ml の infection 価 が に in supernatant し て い る こ と が わ か っ た.

项目成果

Lehmann S: "Ex vivo transmission of mouse-adapted prion strains to N2a and GT1-7 cell lines"Alzheimer's Disease : Advances in Etiology, Pathogenesis and Therapeutics. 679-686 (2001)

Lehmann S：“小鼠适应的朊病毒株离体传播至 N2a 和 GT1-7 细胞系”阿尔茨海默氏病：病因学、发病机制和治疗学的进展。

Atarashi, R: "Abnormal activation of glial cells in the brains of prion protein-deficient mice ectopically expressing prion protein-like protein, PrPLP/Dpl"Molecular Medicine. 7(12). 803-809 (2001)

Atarashi, R：“朊病毒蛋白缺陷小鼠大脑中神经胶质细胞异常激活，异位表达朊病毒蛋白样蛋白 PrPLP/Dpl”分子医学。