プリオン感染培養細胞系によるプリオン複製の分子機構解明

使用感染朊病毒的培养细胞系阐明朊病毒复制的分子机制

• 批准号: 13877046
• 负责人: 片峰 茂
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13877046/
• 关键词: プリオン; プリオン蛋白; プリオン株; 培養神経細胞

これまでプリオン複製の実験モデルが動物個体以外に存在せず、感染実体の生化学的解析が困難であった。プリオン感染培養細胞モデルもこれまで感染複製効率の低さが致命的な欠陥であったが、最近我々は培養神経細胞に遺伝子導入によりPrPを過発現することにより高効率でプリオン感染とその複製が起こることを示した。このプリオン感染培養細胞系は感染因子の生化学的解析を可能ならしめる初の試験管内プリオン複製モデルといえる。今回は、マウスモデルを用いてその存在が明らかにされてきたプリオン株の特性を本培養細胞モデルで検討することにより、プリオン複製モデルとしての妥当性をさらに確立することを目的とした。マウス脳で継代された生物学的個性(発症までの潜伏期、症状、病理変化)の異なる3プリオン株(Fukuoka-1,22L, Chandler)を2種の培養細胞株(1C11,GT1-7)に感染・増殖させ、培養細胞中でも株の個性が維持されるか否かを、ddyマウス脳に感染細胞抽出液を接種することにより検討した。その結果、潜伏期、症状、病理変化の全ての指標で株の個性は培養細胞中でも維持され、株の個性は宿主因子ではなく病原体に規定されることが明らかとなった。一方、電気泳動上の移動度や糖鎖付加パターンを指標とした蓄積PrPScの立体構造は宿主因子に大きく影響されることが示唆された。われわれの培養細胞感染モデルは株の特性を維持することから、モデルとしての有用性がさらに明確となった。

It is difficult to analyze the biochemistry of infected organisms outside the animal body. The low but fatal efficiency of infection and replication caused by adenovirus infection in cultured cells is evident. Recently, I have demonstrated the high efficiency of adenovirus infection and replication due to the discovery of PrP during gene introduction into cultured nerve cells. The biochemical analysis of infectious factors in cultured cell lines is possible. In this paper, the existence of the cell culture medium is discussed, and the suitability of the cell culture medium is established. Three different strains (Fukuoka-1, 22L, Chandler) and two cultured cell lines (1C11, GT1 -7) were identified for their biological characteristics (incubation period, symptoms, and pathological changes). The results, incubation period, symptoms, pathological changes and all indicators of plant personality are maintained in cultured cells, and plant personality host factors are regulated by pathogens. The degree of mobility on one side and the electrical mobility on the other side of the cell are measured by the three-dimensional structure of the PrPSc. The characteristics of cultured cells are maintained, and the usefulness of cultured cells is determined.

项目成果

Lehmann S: "Ex vivo transmission of mouse-adapted prion strains to N2a and GT1-7 cell lines"Alzheimer's Disease : Advances in Etiology, Pathogenesis and Therapeutics. 679-686 (2001)

Lehmann S：“小鼠适应的朊病毒株离体传播至 N2a 和 GT1-7 细胞系”阿尔茨海默氏病：病因学、发病机制和治疗学的进展。

Atarashi, R: "Abnormal activation of glial cells in the brains of prion protein-deficient mice ectopically expressing prion protein-like protein, PrPLP/Dpl"Molecular Medicine. 7(12). 803-809 (2001)

Atarashi, R：“朊病毒蛋白缺陷小鼠大脑中神经胶质细胞异常激活，异位表达朊病毒蛋白样蛋白 PrPLP/Dpl”分子医学。