生体認識分子を融合したナノ粒子による新規な生体内ピンポイント遺伝子導入法の開発

使用与生物识别分子融合的纳米颗粒开发新型体​​内精确基因转移方法

• 批准号: 15025240
• 负责人: 黒田 俊一
• 金额: $ 3.78万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025240/
• 关键词: 遺伝子治療; DDS; ウイルス; ナノバイオ; 中空ナノ粒子

ヒト肝臓に対し極めて高い特異性及び感染性を有するB型肝炎ウイルス(HBV)の感染機構を担う外皮タンパク質を、組換え酵母で「中空ナノ粒子」として大量生産し粒子内部に遺伝子をはじめ薬剤やタンパク質を封入して、生体内でヒト肝臓特異的に高効率で物質を送達させる系を完成した(Nature Biotechnology 2003)。本研究期間中では、ヒト肝癌移植ヌードマウスを用いて移植肝癌に対して高い治療効果を示す治療用遺伝子と投与プロトコールを検討し、肝癌特異的に作動するαフェトプロテインプロモーターと可溶性VEGF受容体遺伝子の組み合わせが最適で、投与経路は尾静脈注射で、投与量は遺伝子として10μgで充分であった。次に、ランダムペプチドを発現するファージを用いてコンビバイオ的手法により、上記移植肝癌モデル内でピンポイントに標的化するアミノ酸配列を選抜した。現在、中空ナノ粒子表面に提示させて使用可能か検討している。更に、ヒト免疫系に認識されにくいHBVエスケープ変異体のアミノ酸変異部位を導入した中空ナノ粒子3種類を作製し、マウスにおいて抗原性を検討したところ,通常使用量の10倍量の中空ナノ粒子を2週おきに6回接種しても抗体を議導しないステルス型中空ナノ粒子1種類が完成していることが判明した。今後は、このステルス粒子を基本として様々な特異性を有する中空ナノ粒子群を開発する予定である。

The hepatitis B virus (HBV) infection mechanism is responsible for the high specificity and infectivity of hepatitis B virus (HBV), and the system for mass production, high efficiency delivery of hepatitis B virus (HBV) specific substances and high efficiency delivery of HBV specific substances in vivo is completed (Nature Biotechnology 2003). During the study period, the optimal combination of soluble VEGF receptor gene and its administration route and tail vein injection was determined. In the second place, the selection of acid for the development of liver cancer is based on the selection of acid for the development of liver cancer. Now, the hollow particle surface prompts you to use the possible search. In addition, the immune system recognized that the three types of hollow particles introduced into the HBV genome were prepared and tested for antigenicity. The amount of hollow particles usually used was 10 times that of the hollow particles. The antibody was inoculated six times in two weeks. The first type of hollow particles was determined. In the future, there will be a predetermined number of empty particle populations that are fundamental to the particle population and specific to it.

项目成果

Aihara, K.: "A Neuron-specific EGF Family Protein, NELL2, Promotes Survival of Neurons through Mitogen-activated Protein Kinases."Brain Res.Mol.Brain Res.. 116. 86-93 (2003)

Aihara, K.：“神经元特异性 EGF 家族蛋白 NELL2 通过丝裂原激活蛋白激酶促进神经元存活。”Brain Res.Mol.Brain Res.. 116. 86-93 (2003)

Yamada, T: "Nanoparticles for the Delivery of Genes and Drugs to Human Hepatocytes"Nature Biotechnology. 21. 885-890 (2003)

Yamada, T：“用于将基因和药物递送至人类肝细胞的纳米颗粒”《自然生物技术》。

Zhang, X.: "Overexpression of Nell-1, a Craniosynostosis Associated Gene, Induces Apoptosis in Osteoblasts during Craniofacial Development"J.Bone Mineral Res.. 18. 2126-2134 (2003)

张，X.：“颅缝早闭相关基因 Nell-1 的过度表达，在颅面发育过程中诱导成骨细胞凋亡”J.Bone Mineral Res.. 18. 2126-2134 (2003)

黒田俊一(分担執筆): "ナノバイオテクノロジーの最新技術"CMC出版. 23 (2003)

Shunichi Kuroda（撰稿人）：“纳米生物技术的最新技术”CMC Publishing 23（2003）。

Kishishita, S.: "Role of Copper Ion in Bacterial Copper Amine Oxidase : Spectroscopic and Crystallographic Studies of Metal-substituted Enzymes"J.Am.Chem.Soc.. 125. 1041-1055 (2003)

Kishishita, S.：“铜离子在细菌铜胺氧化酶中的作用：金属取代酶的光谱和晶体学研究”J.Am.Chem.Soc.. 125. 1041-1055 (2003)