日本人メラノーマの予後に関する病型と進展の分子疫学

日本黑色素瘤预后的疾病类型和进展的分子流行病学

• 批准号: 15026214
• 负责人: 神保 孝一
• 金额: $ 4.74万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15026214/
• 关键词: メラノーマ; 皮膚癌; 分子疫学; 黒色腫; マイクロアレイ; サイクリンD; ベータ・カテニン; メラノコルチン・リセプター

1.目的と方法近年,日本におけるメラノーマの発生率が急激に高まっている.メラノーマは4つの病型が存在するが,日本人ではその約50%が外傷の多い足底にできるALM(Acral Lentigenous Melanoma,末端黒子型黒色腫)である.同じ症状をとるものとして日光露光部の顔面にできるLMM(Lentigo Maligna Melanoma,悪性黒子型黒色腫の)が発症する.これら2型が日本人メラノームの約70-80%の発症頻度を占める.一方,欧米人には日光露光部の背部と顔面,四肢等に好発するSSM(Superficial Spreading Melanoma表層拡大型)と悪性黒子型黒色腫(LMM)の発症が多い(80%以上).SSMの発症予後は,LLMとALMの中間である.本研究では,病理組織学的,臨床的に共通する水平/垂直増殖の病型を呈するが,悪性度と外的要因を全く異にするALM, LMMとSSMを3型のメラノーマの進展予後に関する分子疫学的解析をおこなう.2.結果と意義過去1年間本研究に関し以下の成果を挙げた。(1)DNA microarray解析:ALM5例から原発巣と転移巣を得,DNA microarrayの解析を始めた.8,300遺伝子の転写レベルをこれら症例にて検索し,原発巣と転移巣特異的に発現する遺伝子を5個,7個見出した.現在これらのcDNAからPCR primerを作成しRT-PCRにてその特異性を検索中である.(2)Comparative genomic hybridization/FISH法による検索.これらの手技を用いSSM, ALMを比較した所,DNAのコピー数は,SSMで極めて乏しく,一方ALMでは極めて高く発現されていた.結果として,ALM, SSMとでは,病因的に異なった疾患であり,我々が検索しようとしている遺伝子発現においても著明な差が生じる事が期待出来た.(3)メラノコルチン1レセプター遺伝子の解析:メラノーマ患者41名,正常人または非メラノーマ患者群26名を用い検出できた変異アレルは4種類のみで,そのうちArg67G1nはメラノーマの1例のみに(P=0.43),Ile120Thrはメラノーマの2例,コントロールの1例に検出された(P=0.56).Val92Metはメラノーマ11例(26.8%),コントロール3例(11.5%)で(P=0.14),メラノーマ群がコントロール群の2.3倍であった.Arg163Glnについては,メラノーマ群40例(97.6%),コントロール群24例(92.3%)(P=0.31)と高頻度でみられた.(4)cyclin D_1の免疫組織化学的解析:皮膚原発悪性黒色腫102例,18例(18%)がcyclin D_1が陽性であり発現を示した.Keplan-Meier法による生存曲線でこれら症例を検索した所,95%の信頼区間でcyclin D_1陽性症例と陰性症例間に統計学的に有意な差は認めないが(Log-rank test, p=0.1288),予後との相関傾向を認めた.男女別では,男性(Log-rank test, p=0.0355),女性(Log-rank test, p=0.3047)と男性では95%の信頼区間で統計学的に有意な差を認めた.

1。近年来的目的和方法，日本黑色素瘤的发病率一直在迅速上升。有四种类型的黑色素瘤，其中约有50％是ALM（Acral凸耳黑色素瘤），在足底鞋底发现，通常会受到创伤。 LMM（Lentigo Maligna黑色素瘤）发生在暴露区域的表面，是由相同的症状引起的。这两种类型约占日本黑色素瘤的70-80％。同时，西方人也很容易出现SSM（表面扩散），这通常发生在暴露于阳光的区域的背部，面部和四肢。黑色素瘤（表面增强型）和恶性黑色素瘤（LMM）是常见的（超过80％）。 SSM的发作中间是LLM和ALM。在这项研究中，我们提出了ALM，LMM和SSM预后的常见水平/垂直类型，该预后在恶性肿瘤和外部因素方面有所不同，并且我们对3型黑色素瘤的预后进行了分子流行病学分析，即ALM，LMM和SSM，这些预后是恶性和外部因素的不同。2。结果和显着性在过去一年的这项研究中获得了以下结果。 （1）DNA微阵列分析：我们从5个ALM病例中获得了原发性和转移灶，并开始分析DNA微阵列。在这些情况下，我们搜索了8,300个基因的转录水平，并发现了在原发性和转移灶中特别表达的五个或七个基因。当前，PCR引物是由这些CDNA创建的，并通过RT-PCR搜索其特异性。 （2）通过比较基因组杂交/鱼法搜索。当使用这些技术比较SSM和ALM时，SSM中的DNA拷贝数极差，而它们在ALM中的表达非常高。结果，ALM和ALM在ALM中表达。这是SSM之间的致病性差异，预计我们正在搜索的基因表达会有显着差异。 （3）分析黑色素质素1受体基因：在41例黑色素瘤患者和26例正常或非黑色素瘤患者中仅检测到四个突变等位基因，其中ARG67G1N是一种黑色素瘤病例（P = 0.43），而ILE120THR是黑色素瘤。在两种-MA和一个对照病例中检测到它（p = 0.56）。在11例黑色素瘤（26.8％）和3例对照病例（11.5％）（p = 0.14）中发现了Val92met，而黑色素瘤组比对照组高2.3倍。在40例黑色素瘤组（97.6％）和24例对照组（92.3％）（p = 0.31）中发现了ARG163GLN。 （4）D_1的细胞周期蛋白免疫组织化学分析：102皮肤病中原发性恶性黑色素瘤病例，18例（18％）呈阳性细胞周期蛋白D_1。当使用开plan-meier生存曲线搜索这些病例时，在95％的置信区间中，细胞周期蛋白D_1正和阴性病例之间没有统计学上的显着差异（对数秩检验，p = 0.1288），但是与预后相关的趋势。对于男性和女性，男性的95％置信区间（对数秩检验，p = 0.0355），女性（对数秩检验，p = 0.3047）和男性之间存在统计学上的显着差异。

项目成果

Kamada A, et al.: "Regulation of immature protein dynamics in the endoplasmic reticulum"J Biol Chem. In press.

Kamada A 等人：“内质网中未成熟蛋白质动力学的调节”J Biol Chem。

Jin HY, et al.: "Detection of tyrosinase and tyrosinase-related protein 1 sequences from peripheral blood of melanoma patients using reverse transcription-polymerase chain reaction"J Deramtol Science. 33. 169-176 (2003)

Jin HY 等人：“使用逆转录聚合酶链式反应检测黑色素瘤患者外周血中的酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白 1 序列”J Deramtol Science。

Endo M, et al.: "Detection of human papillomavirus type 16 in bowenoid papulosis and nonbowenoid tissues."Inter J Dermatol. 42・6. 474-476 (2003)

Endo M 等人：“鲍温样丘疹病和非鲍温样组织中人乳头瘤病毒 16 型的检测”Inter J Dermatol 42·6 (2003)。

King KE et al.: "deltaNp63 functions as both a positive and negative transcriptional regulation and blocks in vitro differentiation of murine keratinocytes"Oncogene. 22. 3635-3644 (2003)

King KE等人：“deltaNp63同时发挥正向和负向转录调节作用，并阻断小鼠角质形成细胞的体外分化”癌基因。

Sasaki Y et al.: "Identification of the interleukin-4 receptor gene as a direct target for p73"Cancer Res. 63. 8145-8152 (2003)

Sasaki Y 等人：“将白细胞介素 4 受体基因鉴定为 p73 的直接靶点”Cancer Res。