尋常性白斑のメラニン産生幹細胞の活性化

寻常白癜风中黑色素生成干细胞的激活

基本信息

批准号：
13877131
负责人：
神保孝一
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877131/
关键词：
色素再生幹細胞尋常性白斑 hair bulge melanocyte 遺伝子治療メラニン再生医療 bulge

项目摘要

尋常性白斑は全身の皮膚の白斑を生ずる難治性疾患疾患であるがこの疾患を治療する方法としてわれわれは毛嚢部bulge領域に存在するとされる色素産生幹細胞に注目した。ヒト及び動物の外毛根鞘にメラニン再生幹細胞が存在することは古くから知られており、紫外線照射後にメラニン再生は毛包周囲から生じるが、我々は既にこのことがメラニン再生幹細胞が活性化され、毛包より周辺皮膚へと細胞が移動増殖する結果であると報告した。本研究ではこれらの基礎的、臨床的成果を尋常性白斑の治療法開発に応用し、これら再生幹細胞の活性化にチロシナーゼ及びTRP-1遺伝子を選択的に幹細胞に導入する。bulge transplantationによりhostのfollicle切開挿入部よりdonor由来の細胞が遊走し、follicleの外壁に沿って、細胞の層を作る姿が観察された。4〜6の細胞層からなり、その中にTRP1陽性細胞が散見されるという結果を得た。元来にhostにはTRP1陽性細胞は存在しないため、donor由来と考えられた。具体的な方法としては、互いに近交系となるACIラット(毛色黒)とWisterラット(毛色白)を用い、ACIラットのvibrissalよりbulgeを取り出し、wisterラットのbulgeと入れ替える。その後、その移植操作をしたfollicleをnude mouseの皮下に留置しincubateした。埋入から4週もしくは8週経った時点で摘出し、anti-TRP-antibodyにて免疫抗体染色を行なって、陽性細胞の分布を観察し、新たに出現した色素細胞の動態を観察した。現在はbulge organ cultureを行い、niche環境より遊走してくる幹細胞の同定、単離培養法を確立させるべく検討していく。得られた細胞はSSEA-1などの抗幹細胞マーカー抗体にて分化段階を特定していくことも可能である。つい先年までは存在すら疑問視されていたhair follicle bulge内のmelanocyte stem cellは現在ではその存在は確認されたものと考えられており、今後はそれをどう生かし、再生医療の現場で活用するかが焦点となっている。melanocyte stem cellがどういう経路をたどりmature melanocyteと分化していくかについてはいまだ明確な説明はなされておらず、そのために必要な因子も同定されてはいない。推測段階としては、b-FGF、BMP、HGFなどが考えられているのでこれらの遺伝子導入の効果について検討している。このようにして最終的にはmelanocyte stem cellを利用した尋常性白斑の遺伝子治療へと発展させたい。

Vurggaris是一种顽固性的疾病，会导致整个身体皮肤中的白癜风，作为治疗这种疾病的一种方式，我们专注于产生色素的干细胞，据说它们存在于毛卵泡的凸起区域中。早就知道，黑色素再生的干细胞存在于人类和动物的外部根鞘中，黑色素的再生发生在紫外线辐照后毛囊周围发生，但我们已经报道这是黑色素再生干细胞被激活的结果，并且细胞被激活并从毛纤毛中迁移并从毛囊中迁移至周围的毛发。在这项研究中，这些基本和临床结果将应用于白癜风氏病的处理，酪氨酸酶和TRP-1基因将选择性地引入干细胞中以激活这些再生干细胞。源自从卵泡切口插入宿主通过凸起移植的供体的细胞，观察到一层细胞沿卵泡的外壁形成。获得了由4-6个细胞层组成的结果，在细胞中发现了TRP1阳性细胞。最初，宿主上没有TRP1阳性细胞，因此被认为是从供体中得出的。一种特定的方法是使用ACI大鼠（黑色涂层）和北部大鼠（白色涂层），它们彼此近交，并从ACI大鼠的颤动中除去鳞茎，然后用子鳞大鼠代替它们。然后将植入的叶子放在裸鼠的皮肤下并孵育。植入后4或8周后，使用抗TRP抗体进行免疫测定染色，以观察阳性细胞的分布，并观察到新出现的色素细胞的动力学。目前，我们正在进行凸起器官培养，并正在研究从利基环境迁移的干细胞的鉴定和分离。也可以使用抗茎细胞标记抗体（如SSEA-1）来区分所获得的细胞。毛囊隆起中的黑素细胞干细胞甚至一直在去年受到质疑，直到去年才被确认已经存在，重点将放在如何在将来使用它并将其用于再生医学领域。尚未清楚地解释了黑素干细胞会采取并分化为成熟的黑素细胞的路径，并且尚未鉴定出所需的因素。作为投机阶段，考虑了B-FGF，BMP，HGF等，因此正在研究这些基因转移的影响。通过这种方式，我们最终希望使用黑素细胞干细胞发展为白癜风的基因治疗。