ウイルス抵抗性遺伝子を介した防御応答機構の解明

阐明病毒抗性基因介导的防御反应机制

• 批准号: 15028206
• 负责人: 丹生谷 博
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15028206/
• 关键词: タバコモザイクウイルス; 抵抗性遺伝子; N遺伝子; 防御応答; ウイルス耐性植物; 遺伝子組換え; ジーンサイレンシング; スプライシング

Nicotiana tabacum cv.Samsun NN由来のN遺伝子のcDNAを用いて,Nタンパク質と相互作用する宿主細胞由来のタンバク質のcDNAクローニングを行い,複数の14-3-3イソフォームを単離した。Nタンパク質のロイシンリッチリピート(LRR)ドメインをプローブとしたファーウエスタンブロット法では14-3-3イソフォームのうちωグループのa, b, c, f, hおよびΨグループのe, iが顕著に結合能を示した。しかし,κグループのd, gは結合能は低く,εグループのT(S)は全く結合しなかった。TMVのエリシターであるレプリカーゼのヘリカーゼドメインをプローブとした場合にもLRRをプローブとした場合とほとんど同様の結果が得られた。逆に,14-3-3をプローブとして結合能を解析したところ,LRRドメインやLRRを含むNタンパク質全体が顕著な結合能を示し,TIRやNBSドメインおよびコントロールのGSTとは全く結合しなかった。また,14-3-3プロープはヘリカーゼドメインと顕著な相互作用を示し,TMVのOMおよびOb系統由来の何れのヘリカーゼとも同様な結合能を示した。14-3-3遺伝子の発現についてノーザンブロット法により解析した結果,イソフォームhはTMV感染後48時間にゼロ時間におけるレベルまでに上昇を示した。以上の結果より,ヘリカーゼドメインは第3のタンパク質を介して間接的にNタンパク質と相互作用していると推定できるので,14-3-3タンパク質はそのような介在タンパク質の候補として有力であると考えられた。

Nicotiana tabacum cv.Samsun NN cDNA sequence of N genes derived from host cells, N genes interacting with each other, and a 14-3-3 complex sequence. The NRR method is 14-3-3. The NRR method is a combination of a, b, c, f, h and e. The combination energy is low, the combination energy is low, and the combination energy is low. The results of TMV's selection process are as follows: In the reverse direction, 14 -3-3, the binding energy is analyzed, LRR is included in the total binding energy,TIR and NBS are included in the total binding energy, GST is included in the total binding energy The 14 -3-3 model shows how the TMV OM and Ob systems are derived and how they combine. 14-3-3 The results of analysis showed that the time of infection increased after 48 hours of TMV infection. The above results show that the interaction between the third and fourth elements is indirect, and the interaction between the third and fourth elements is presumed to be 14 -3-3.

项目成果

K.Yoshioka: "Interaction of Tomato mosaic virus movement protein with tobacco RIO kinase."Molecules and Cells. 17・2(印刷中). (2004)

K. Yoshioka：“番茄花叶病毒运动蛋白与烟草 RIO 激酶的相互作用。”17·2（出版中）。

Y.Matsushita: "The catalytic subunit of protein kinase CK2 phosphorylates in vitro movement protein of Tomato mosaic virus."Journal of General Virology. 84. 497-505 (2003)

Y.Matsushita：“蛋白激酶 CK2 的催化亚基磷酸化番茄花叶病毒的体外运动蛋白。”普通病毒学杂志。

K.Konagaya: "Members of 14-3-3 protein isoforms interacting with both Tobacco mosaic virus resistance gene product N and the Viral elicitor."Journal of General Plant Pathology. 70(印刷中). (2004)

K. Konagaya：“与烟草花叶病毒抗性基因产物 N 和病毒激发子相互作用的 14-3-3 蛋白异构体的成员”。《普通植物病理学杂志》70（出版中）。