クロロウイルス感染における初期遺伝子発現

氯病毒感染的早期基因表达

• 批准号: 15028213
• 负责人: 山田 隆
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15028213/
• 关键词: クロロウイルス; 初期遺伝子発現; ヒアルロナン合成酵素; キチン合成酵素; プロモーター選択; read-through; 細胞壁分解; 多糖分解リアーゼ

・クロロウイルスCVK2感染初期遺伝子の同定と発現解析ウイルス感染後、5-10minの間にウイルス初期遺伝子が発現する。最初期に発現する遺伝子計23個を同定し、その発現パターンと特異的プロモータ構造を解析した。初期遺伝子には、TFIIB,mRNA capping enzyme,helicase,transcription factors等転写に関係する因子、aa-tRNA synthetases,ribosomal proteins等翻訳関係因子、その他各種代謝系に関係する酵素がコードされていた。これら各々の感染における役割の確定が興味深い問題である。クロロウイルス感染初期転写の特徴は、感染後40minでそのパターンが大きく切り替わる事である。すなわち当初poly(A)付加されるmRNAは感染後40min以降は全くpoly(A)を失う。転写開始、終結が40min以降は極めてルーズになり、readthroughが頻繁に起こる。感染後、早期に生成される宿主細胞表面ヒアルロン酸、キチンは、宿主細胞を一時的に外環境より保護する意義があると思われる(論文発表)。・クロロウイルスCVK2のコードする新奇細胞壁分解リアーゼの解析ウイルスが宿主細胞壁を特異的に分解するには複数の酵素活性が必要であり、これまでに3種の多糖加水分解酵素遺伝子をウイルスゲノム上に同定してある。さらに未知ORFが宿主溶解活性があることを見いだしvAL-1と命名した。GST-融合タンパク質として大腸菌で生成したvAL-1を用いて、宿主細胞壁を分解し生成オリゴ糖をMALDI-TOFF-MASSスペクトロメトリーで解析した。その結果、この酵素はC2位に側鎖を持つグルクロン酸のβ結合を脱離反応で切断するリアーゼ活性を有することが判明した。既知のリアーゼとは諸性質を異にし酵素学的にも興味深い酵素である(論文発表)。また、切断基質となる糖鎖構造もまたユニークであり、このウイルスの宿主特異性を考える上で重要な情報となる。

·Analysis of the isostatic development of CVK2 initial gene 5-10min after infection At the beginning of the discovery, 23 pieces of information were identified, and some of them were analyzed. There are also early genetic factors such as TFIIB,mRNA capping enzymes,helicase, and transcription factors, reverse genetic factors such as aa-tRNA synthases,ribosomal proteins, and other enzymes related to various metabolic systems. The problem of infection is very serious. The characteristics of early infection are: 40min after infection; The expression of poly(A) mRNA was reduced to complete poly(A) mRNA 40min after infection. Start and end of writing: 40min to drop to the extreme, readthrough to frequent. After infection, early production of host cell surface protein, protein, host cell protection in the immediate environment of the significance of this (paper) The novel cell wall decomposition of CVK2 is analyzed by enzyme activity for host cell wall-specific decomposition. Three polysaccharide hydrolysis enzyme enzymes are required for host cell wall-specific decomposition. The ORF is unknown and the host lysis activity is unknown. GST-fusion proteins are produced in E. coli and analyzed by MALDI-TOFF-MASS. As a result, it was found that the enzyme was able to bind to the β-site of the C2-site and to dissociate itself from the β-site. It is known that all kinds of properties are different from each other. Important information on host-specific properties of cut substrates

项目成果

Hideki Onimatsu: "Vp130, a chloroviral surface protein that interacts with the host Chlorella cell wall"Virology. 319. 71-80 (2004)

Hideki Onimatsu：“Vp130，一种与宿主小球藻细胞壁相互作用的氯病毒表面蛋白”病毒学。

Takeru Kawasaki: "Immediate early genes expressed in chlorovirus infections"Virology. 318. 214-223 (2004)

Takeru Kawasaki：“在氯病毒感染中表达的早期基因”病毒学。

Ichiro Sugimoto: "vAL-1, a novel polysaccharide lyase encoded by chlorovirus CVK2"FEBS Letters. 559. 51-56 (2004)

Ichiro Sugimoto：“vAL-1，一种由氯病毒 CVK2 编码的新型多糖裂解酶”FEBS Letters。