植物の高次生命現象における小胞輸送の機能解析

植物高等生命现象中囊泡运输的功能分析

• 批准号: 15031228
• 负责人: 上田 貴志
• 金额: $ 3.58万
• 依托单位: The University of Tokyo (2004)The Institute of Physical and Chemical Research (2003)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15031228/
• 关键词: Rab GTPase; endocytosis; SNARE; Ara6; Ara7; Rha1; Vam3; Arabidopsis; エンドソーム; エンドサイオーシス; Rab5; シロイヌナズナ; GNOM; リサイクリング

Rab GTPaseは,GTP型とGDP型の構造変換を通し,輸送小胞が標的膜へと輸送される際の分子スイッチとして機能している.一般的に,GTPを加水分解しGDP型となったRab GTPaseは,再びGTP型へと活性化され,次のGTPase cycleをまわることになるが,この際のヌクレオチド交換反応には,GDP/GTP交換因子(GEF)と呼ばれる分子が必要であることが知られている.そこで,シロイヌナズナにおけるRab5グループの機能を明らかにするため,まずRab5のGEFの機能解析を試みた.他の生物において,Rab5のGEFはVps9 domainと呼ばれる保存された構造を持つことが報告されている.シロイヌナズナゲノム中でVps9 domainを有するタンパク質を探索したところ,Vps9 domainを有するタンパク質をコードする二つの遺伝子が見いだされた.そのうち,発現が確認された一つの遺伝子(AtVps9a)をクローニングし,精製タンパク質を用いてAra7に対するGEF活性を測定したところ,非常に強いGEF活性が検出された.また,in vitroでのpull-down assayにより,AtVps9がAra6,Ara7,Rha1の全てと結合することも明らかとなった.このことから,シロイヌナズナのRab5関連タンパク質は,その構造上の特異性に反し,いずれの分子もが同一のGEFにより制御されていることが示唆された.これが事実であれば,AtVPS9遺伝子が破壊された植物においては,Rab5グループの全ての分子が不活化していると考えられ,この変異体を解析することにより,植物におけるRab5グループの機能をその総和として解析することが可能であると期待される.現在この変異体の解析を進めているが,予備的な解析において胚発生のかなり初期より細胞形態に異常が見られることから,この遺伝子産物が発生の初期から必須の働きを担っているものと予測される.今後の生化学的,遺伝学的解析を通して,AtVps9の機能をさらに明らかに出来るものと期待している.atvps9変異体の解析に加え,各rab5変異体の解析も順調に進行している.既にara6,rha1変異体については戻し交雑を終え,2重変異体の作出も完了している.

Rab GTP酶，GTP型GTP GDP型核糖核酸酶，转染小细胞肺癌的细胞膜，转染高表达的寡聚核苷酸分子，转染能正常表达。一般的酶，GTP加水分解酶GDP型水解酶Rab GT3酶，再水解GTP型水解酶活性化酶，次水解GTP循环酶解酶解酶他生生物学证据，Rab5全基因组疫苗Vps9域有无保存基因组疫苗制造坚持基因组疫苗接种证据，AtVps9a中有无Vps 9域有无基因组疫苗接种探索基因组疫苗，AtVps9a中有无基因组疫苗接种探索基因组疫苗，At精原纤溶酶抑制剂应用AtVps9-Ara6，Ara7，Rha1-全原纤溶酶复合物下拉测定试剂盒。精原纤溶酶抑制剂应用Rab5-全原纤溶酶抑制剂，超常规的精原纤溶酶抑制剂GEF活性测定试剂盒。同一个GEF全球环境基金的申请制度和分析标准显示了植物保护申请、AtVPS9植物保护子项目和植物保护子项目、Rab5植物保护子项目和非活性化植物保护子项目和试验标准、植物保护体分析和植物保护子项目申请、Rab5植物保护子项目和植物保护体分析和植物保护子项目可能的潜在风险。非在造血干细胞体解译给予器官移植，给予非造血干细胞体解译给予器官移植，给予造血干细胞体解译给予器官移植，量子生物学的，量子学的解析通范式，AtVps9量子能量子化解释出来的量子力学期待着范式转换，atvps 9量子体解析加范式，各rab5量子体解析量子力学进行范式转换。Rha 6，rha1，rha 2，rha 3，rha 4，rha 5，rha

项目成果

Actin-based motility of endosomes is linked to the polar tip growth of root hairs.

• DOI: 10.1016/j.ejcb.2004.12.029
• 发表时间: 2005-07
• 期刊: European journal of cell biology
• 影响因子: 6.6
• 作者: Boris Voigt;A. Timmers;J. Šamaj;A. Hlavacka;T. Ueda;M. Preuss;E. Nielsen;J. Mathur;N. Emans;H. Stenmark;A. Nakano;F. Baluška;D. Menzel

Functional differentiation of endosomes in Arabidopsis cells

• DOI: 10.1111/j.1365-313x.2004.02249.x
• 发表时间: 2004-12-01
• 期刊: PLANT JOURNAL
• 影响因子: 7.2
• 作者: Ueda, T;Uemura, T;Nakano, A
• 通讯作者: Nakano, A

VAN3 ARF-GAP-mediated vesicle transport is involved in leaf vascular network formation

• DOI: 10.1242/dev.01716
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: DEVELOPMENT
• 影响因子: 4.6
• 作者: Koizumi, K;Naramoto, S;Fukuda, H
• 通讯作者: Fukuda, H

Grebe M. et al.: "Arabidopsis sterol endocytosis involves actin-mediated trafficking via ARA6-positive early endosomes"Curr.Biol.. 13. 1378-1387 (2003)

Grebe M. 等人：“拟南芥甾醇内吞作用涉及通过 ARA6 阳性早期内体进行肌动蛋白介导的运输”Curr.Biol.. 13. 1378-1387 (2003)

中野明彦, 今本尚子, 藤木幸夫編(分担執筆): "細胞内輸送研究の最前線"羊土社. 233 (2003)

Akihiko Nakano、Naoko Imamoto、Yukio Fujiki（合著者）：“细胞内运输研究的前沿”Yodosha 233（2003）。