ABCGタンパク質複合体の品質管理機構

ABCG蛋白复合物的质量控制机制

• 批准号: 15032224
• 负责人: 松尾 道憲
• 金额: $ 2.62万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15032224/
• 关键词: ABCタンパク質; ABCG; 小胞体; コレステロール; 品質管理; 膜タンパク質複合体; リン脂質; 二量体; RXR配列

ステロール輸送に関与するABCGタンパク質は、N末側に細胞質側のヌクレオチド結合領域、C末側に6回膜貫通ヘリックスを持つ。ABCG5とABCG8はヘテロ二量体を形成して初めて小胞体から細胞膜へ輸送され、細胞膜上で機能する。ホモ二量体を形成すると小胞体に残留し、分解される。ABCG5,ABCG8と相同なABCG1,ABCG2は、ホモ二量体を形成して細胞膜に発現し機能する。ABCGタンパク質を一例として、ホモ二量体、ヘテロ二量体の認識機構を明らかにし、膜タンパク質複合体の品質管理機構を明らかにすることを目的として、ABCG1とABCG5のキメラタンパク質を作成し、細胞内局在を解析した。細胞質領域がABCG1で膜領域がABCG5のキメラタンパク質は単独発現で細胞膜に局在したのに対し、細胞質領域がABCG5で膜領域がABCG1のキメラタンパク質は細胞内(小胞体)に局在した。また、ABCG2とABCG8のキメラタンパク質の細胞内局在を解析し、同様の結果が得られた。これらのことから、ABCG5,ABCG8の細胞質領域がホモ二量体の小胞体残留に関与すると予想された。これまでに細胞質領域のRXR配列が、K_<ATP>チャネルを含む膜タンパク質複合体の品質管理機構として、同定されている。ABCG5、ABCG8の細胞質領域中の種間で保存されているRXR配列が、二量体構造の認識に機能する可能性を検討するため、RXR配列変異体を作製した。免疫染色と糖鎖解析より、ABCG5のRXR配列変異体は、単独発現では細胞内に局在し、野生型ABCG8共発現させると細胞膜に局在することを明らかにした。ABCG8のRXR配列変異体でもABCG5変異体と同様の結果が得られた。これらのことから、ABCG5とABCG8では、RXR型小胞体残留・逆送シグナルと異なる機構で品質管理されることが明らかとなった。細胞質側に存在する未知のシグナルによって品質管理がなされている可能性が示唆された。

ス テ ロ ー ル conveying に masato and す る ABCG タ ン パ ク は, at the end of the N side に cytoplasmic side の ヌ ク レ オ チ ド combining domain, at the end of the C side に 6 back to transmembrane ヘ リ ッ ク ス を つ. ABCG5 と ABCG8 は ヘ テ を ロ 2 quantity body formation し て early め て small cell body か ら membrane へ conveying さ れ, function of cell membranes で す る. The ホモ diploid を forms すると small cells に, which remain and decompose される. ABCG5,ABCG8と are the same as なABCG1,ABCG2 に and ホモ diplomes を to form a に て cell membrane に and exhibit a する function. ABCG タ ン パ ク qualitative を case と し て, ホ モ quantity body, ヘ テ ロ second quantity body の know institutions を Ming ら か に し, membrane タ ン パ ク mass quality management agencies in complex の を Ming ら か に す る こ と を purpose と し て, ABCG1 と ABCG5 の キ メ ラ タ ン パ ク を し, consummate quality bureau in cells in analytical し を た. Cytoplasmic domain が ABCG1 で membrane area が ABCG5 の キ メ ラ タ ン パ ク qualitative は 単 発 alone now で membranes に bureau in し た の に し seaborne, cytoplasmic domain が ABCG5 で membrane area が ABCG1 の キ メ ラ タ ン パ ク qualitative は cells (small cell body) に bureau in し た. Youdaoplaceholder0, ABCG2と, ABCG8 <s:1> キメラタ, パ パ the intracellular localization of the embryonic tissue <s:1> is を. The results of the analysis of が and the same type of <s:1> are が. こ れ ら の こ と か ら, ABCG5 and ABCG8 の cytoplasmic domain が ホ モ 2 quantity body の small cell body residual に masato and す る と to think さ れ た. こ れ ま で に cytoplasmic domain の RXR column が, K_ (ATP > チ ャ ネ ル を contains む membrane タ ン パ ク mass quality management agencies in complex の と し て, with constant さ れ て い る. In the field of ABCG5 and ABCG8 の cytoplasm の interspecific で save さ れ て い る RXR 2 quantity body structure の が, know に function す る possibility を beg す 検 る た め, RXR match column - variant を cropping し た. Immune dyeing と sugar lock resolution よ り, ABCG5 の RXR match column - variant は, 単 発 alone now で は に bureau in cells in し, wild type ABCG8 発 now さ せ る と membrane に bureau in す る こ と を Ming ら か に し た. The ABCG8 RXR coordination variant で で ABCG5 variant と the same <s:1> result が られた. こ れ ら の こ と か ら, ABCG5 と ABCG8 で は, RXR type small cell body residues, inverse send シ グ ナ ル と different な る で quality management さ れ る こ と が Ming ら か と な っ た. On the cytoplasmic side, there is a に unknown <s:1> シグナ によって によって quality management がなされて る る possibility が suggesting された.

项目成果

Kimura, Y.et al.: "ATP hydrolysis-dependent multidrug efflux transporter, MDR1/P-glycoprotein."Curr.Drug Metab.. 5. 1-10 (2004)

Kimura, Y.等人：“ATP 水解依赖性多药外排转运蛋白，MDR1/P-糖蛋白。”Curr.Drug Metab.. 5. 1-10 (2004)

Ikeda, Y.et al.: "Post-transcriptional regulation of human ABCA7 and its function for the apoA-I-dependent lipid release."Biochem.Biophys.Res.Com.. 311. 313-318 (2003)

Ikeda, Y.等人：“人 ABCA7 的转录后调节及其对 apoA-I 依赖性脂质释放的功能。”Biochem.Biophys.Res.Com. 311. 313-318 (2003)

Human ABCA3, a product of a responsible gene for abca3 for fatal surfactant deficiency in newborns, exhibits unique ATP hydrolysis activity and generates intracellular multilamellar vesicles,

人类 ABCA3 是导致新生儿致命性表面活性剂缺乏的 abca3 基因的产物，表现出独特的 ATP 水解活性并产生细胞内多层囊泡，

• 发表时间: 2004
• 期刊: Biochem Biophys Res Commun, 324
• 作者: Nagata;K.;Yamamoto;A.;Ban;N.;Tanaka;AR.;Matsuo;M.;Kioka;N.;Inagaki;N.;and Ueda;K.
• 通讯作者: K.

Kimura, Y.et al.: "Microanalysis for MDR1 ATPase by high-performance liquid chromatography with a titanium dioxide column."Analyt.Biochem.. 326. 262-266 (2004)

Kimura, Y.等人：“通过使用二氧化钛柱的高效液相色谱法对 MDR1 ATP 酶进行微量分析。”Analyt.Biochem.. 326. 262-266 (2004)

Edited by Holland, I.B., Cole, S.P.C., Kuchler, K., Higgins, C.: "ABC PROTEINS 〜From Bacteria to Man"ACADEMIC PRESS. 647 (2003)

Holland, I.B.、Cole, S.P.C.、Kuchler, K.、Higgins, C. 编辑：“ABC 蛋白质 ~从细菌到人类”学术出版社 647 (2003)。