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タンパク質膜透過装置を構成するSecYタンパク質の進化と分化

构成蛋白质膜渗透装置的SecY蛋白的进化和分化

基本信息

批准号：
05858081
负责人：
中井正人
金额：
$ 0.51万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05858081/
关键词：
タンパク質膜透過タンパク質輸送ラン藻チラコイド膜 SecY

项目摘要

ラン藻は原核生物であるが、細胞内にチラコイド膜と呼ばれる独立した内膜系を持っている。したがって、細胞質膜に移行するタンパク質とチラコイド膜に移行するタンパク質は、厳密に仕分けられねばならないが、仕分けに関与する膜透過装置等については、全く分かっていない。本研究では、大腸菌等の細胞質膜でタンパク質の膜透過装置を構成しているSecタンパク質が、ラン藻の二つの膜系にも存在しているのかどうか、まず、遺伝子レベルで検索した。SecYタンパク質は、大腸菌等でタンパク質の細胞質膜透過の中心的役割を担っている内在性の膜タンパク質である。最初に、タバコ葉緑体DNAのspcオペロン領域をプローブとして、ラン藻Synechococcus PCC7942のゲノムDNAからspcオペロンを含むDNA断片を単離した。塩基配列の解析の結果、このDNA断片中に、secY遺伝子を同定した。サザン解析の結果、secY遺伝子ラン藻はゲノム中に1コピー存在することが示唆された。次に、ラン藻細胞内に一種類しか存在しないように見えるこのsecY遺伝子産物が、細胞質膜、チラコイド膜のいずれの膜系に存在しているのか明らかにする目的で、以下の実験を行った。(1)ラン藻SecYタンパク質の一部を大腸菌内で大量に発現させ、これを抗原として得られた抗血清を用いて、ラン藻の各膜画分に対して抗体染色を行った。(2)ヒトc-Mycタンパク質の部分配列がC末端に付加されるように改変したラン藻secY遺伝子をラン藻に形質転換し、形質転換株の各膜画分に対して、付加したc-Myc部分を認識する抗体を用いた抗体染色を行った。(1)(2)いずれの解析結果も、ラン藻細胞内でSecYタンパク質は、細胞質膜とチラコイド膜の両方に存在していることを示した。このことは、SecYタンパク質が、両膜系でタンパク質の膜透過に関与している可能性を強く示唆するものである。

The algae is a prokaryotic organism, and the intracellular membrane is an independent one. Cytoplasmic membrane migration Shifen けられねばならないが, Shifen けにSeki and する membrane permeability device, etc. については, 全く分かっていない. This study examines the structure of the membrane permeability device for the cytoplasmic membrane of Escherichia coli and other bacteria. Quality が、ランンの二つのfilm system にもexistent しているのかどうか、まず、缝子レベルで検SO した. SecY タンパク性は, Escherichia coli and other でタンパクのcytoplasmic membrane permeability center of the yakuza っている internal membrane タンパク性である. Initial に、タバコchloroplast DNAのspcオペロン区をプローブとして、ランAlgae Synechococcus PCC7942 DNA fragments containing DNA fragments. The result of the analysis of the base arrangement, the DNA fragment, and the secY residue are the same. The results of the サザン analysis, secY そ子ラン草はゲノム中に1コピーexisting することが说憆された. There is a kind of しか in the algae cells, and the しないように见えるこのsecY legacy product が, the cytoplasmic membrane , チラコイド film のいずれの Film system しているのか明らかにするpurpose で, the following の娟を行った. (1) The part of the SecY algae that contains large amounts of coliform bacteria is resistant to The antiserum obtained by Hara Takashi was stained with Takashi and Rinozoa antibodies on each membrane. (2) Partial arrangement of ヒトc-Mycタンパク性がC-terminal にFUKA されるように Change 変したラン草secY 伝子をラン草にThe c-Myc part of the morphological changes and the morphological changes of the strains were stained with antibodies and stained with antibodies. (1) (2) The results of analysis of いずれのも, でていることをした showing the presence of ででタンパク inside the algae cell and the とチラコイド membrane of the cytoplasmic membrane. The このことは, SecYタンパク性が, and the 両film system でタンパク之の片 permeability and している possibilities are strong and strong.