網羅的プロテオーム解析とプロテオームデータベース構築による救命救急傷病の病態解明

<全体>:平成21年度は、引き続き臨床検体のタンパク質解析、バイオマーカースクリーニング、および診断法への応用を進めた。また、臨床検体および解析データに関する情報保護のためにNEC社製セキュリティーサーバーを導入し、解析データの一覧表示機能などを新たに付加した。<臨床検体スクリーニング>:汎用性の高いウエスタンブロット法での多検体スクリーニングを検討した。48検体について一度に複数のバイオマーカーを測定できる多検体高速スクリーニングシステムを構築し、敗血症のスクリーニングに応用した。CRPを含む7種類のタンパク質について、コントロールを含む75名の血清に対してバイオマーカーとしての有用性を検討した結果、新たに2種類のタンパク質について敗血症病態との相関が確認された。<蘇生後脳症>:患者脳脊髄液の大規模定量解析により同定された約300種類のタンパクの挙動から、(i)蘇生後脳症患者群における血液脳関門の破綻、(ii)予後不良群における中枢神経組織損傷、(iii)酸化ストレス応答亢進、(iv)好中球や単球の活性化が示唆された。最終的に、予後良好群に比べて予後不良群で2倍以上の増加を示した15種類のタンパク質を"予後不良マーカー"とした。これまでに、新規マーカーを含む9種類について、コントロールを含む22名の脳脊髄液に対してスクリーニングを行い、カルシウム結合タンパク質、シグナル分子、代謝酵素などを含む4種類について、患者予後予測における有用性を確認した。<診断技術>:新規バイオマーカーの臨床応用に向けて、急性期の病態把握や予後判定に有用な簡易測定法を検討した(100ng程度の新規マーカーを15分以内に検出可能)。

<全体>:平成21年度は、引き続き臨床検体のタンパク質解析、バイオマーカースクリーニング、および診断法への応用を進めた。また、臨床検体および解析データに関する情報保護のためにNEC社製セキュリティーサーバーを導入し、解析データの一覧表示機能などを新たに付加した。<臨床検体スクリーニング>:汎用性の高いウエスタンブロット法での多検体スクリーニングを検討した。48検体について一度に複数のバイオマーカーを測定できる多検体高速スクリーニングシステムを構築し、敗血症のスクリーニングに応用した。CRPを含む7種類のタンパク質について、コントロールを含む75名の血清に対してバイオマーカーとしての有用性を検討した結果、新たに2種類のタンパク質について敗血症病態との相関が確認された。<蘇生後脳症>:患者脳脊髄液の大規模定量解析により同定された約300種類のタンパクの挙動から、(i)蘇生後脳症患者群における血液脳関門の破綻、(ii)予後不良群における中枢神経組織損傷、(iii)酸化ストレス応答亢進、(iv)好中球や単球の活性化が示唆された。最終的に、予後良好群に比べて予後不良群で2倍以上の増加を示した15種類のタンパク質を"予後不良マーカー"とした。これまでに、新規マーカーを含む9種類について、コントロールを含む22名の脳脊髄液に対してスクリーニングを行い、カルシウム結合タンパク質、シグナル分子、代謝酵素などを含む4種類について、患者予後予測における有用性を確認した。<診断技術>:新規バイオマーカーの臨床応用に向けて、急性期の病態把握や予後判定に有用な簡易測定法を検討した(100ng程度の新規マーカーを15分以内に検出可能)。