Die komplexe Plastide der Dinoflagellaten

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Dinoflagellaten haben unterschiedliche Ernährungsstrategien. Im hier beantragten Projekt stehen phototrophe Dinoflagellaten mit komplexen, Peridinin-haltigen Plastiden im Mittelpunkt. Zunächst soll mittels eines Vergleiches von früh in der Plastidenevolution in den Zellkern versus nach der Etablierung des sekundären Rotalgensymbionten transferierter Gene der Mechanismus des Gentransfers in das Dinokaryon untersucht werden. Hierzu müssen Bibliotheken erstellt, Kern-lokalisierte sowie teilweise das Plastidenkomplement an Protein-kodierenden Genen bestimmt werden. Für letzteres steht eine einfache TransposonInsertions-Methode zur Verfügung. Die Dinokaryon-kodierten Plastidenproteine besitzen ein zwei- bzw. dreigeteiltes N-terminales topogenes Signal. Dies soll in einem zweiten Arbeitsbereich in heterologen und homologen Transportstudien untersucht werden. Diese Versuche werden zeigen, wie Kern-kodierte Plastidenproteine der Dinoflagellaten intrazellulär sortiert werden und eine vergleichende phylogenetische und mechanistische Beschreibung gestatten. In einem dritten Arbeitsbereich soll ein Transformationsprotokoll erarbeitet werden, mit dessen Hilfe die topogenen Signale und deren Hierachrchie in in vitroExperimenten bestimmt werden kann.