温度感受性変異体を用いたc-fos遺伝子機能の解析

使用温度敏感突变体分析 c-fos 基因功能

• 批准号: 63015018
• 负责人: 伊庭 英夫
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 1988
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63015018/
• 关键词: fos遺伝子; fos関連抗原; ロイシン ジッパー構造; in vitro mutagenesis; トランスフォーメーション; 分子クローニング

前年度までの成果をふまえ,本年度はin vitro mutagenesisによるfosタンパクの機能領域の同定と,前年度に見い出したc-fos関連抗原の遺伝子のクローニングと構造決定をおこなったので報告する。1.fos遺伝子のin vitro mutagenesisv-fos遺伝子内に欠失変異をもつレトロウイルスベクターを使用して,CEFに対するトランスフォーメーション活性及びニワトリ神経網膜細胞に対する増殖刺激活性を検定した。その結果,野生株v-fosの約1/4の分子量からなる100アミノ酸残基未満からなる変異体(NDCD2)のfosタンパク質にも両活性が存在した。この領域は,野生株v-fosの中央部に位置し,進化的に極めて良く保存されていると共に,c-jun,GCN4遺伝子産物とある程度の相同性をもっていた。NDCD2のもつ変異体fosタンパク質は,野生株v-fosと異なり,細胞内でリン酸化を受けていないことから,v-fosタンパク質によるトランスフォーメーションには,fosタンパクのリン酸化が必須でないことが示された。2.fos関連遺伝子のクローニングと構造解析前年度に調製した抗fosペプチド抗体が,CEF中からc-fosタンパク質以外に数種の関連抗原を免疫沈降することを見い出した。この関連抗原が,細胞の増殖刺激を与えた後にc-fosタンパク質とは異なったkineticsで発現の誘導を受けることから,その機能の重要性が示唆された。そこで,この関連抗原の遺伝子のクローニングを試み,ニワトリゲノミックライブラリーから,複数のクローンを得た。そのうち1つのlocusから由来するものについては,塩基配列決定を含み構造解析中である。これまでの結果,c-fos遺伝子とはことなる未知の遺伝子であることが判明したが,c-fosタンパク質と同様leucine zippen構造を保有していることがわかった。

In the previous year, the results of the previous year were in good agreement. This year, the field of in vitro mutagenesis is the same as that in the field of fos. In the previous year, it was reported that the decision was made on the basis of the results of the previous year. There is a lack of information in the 1.fos sub-in vitro mutagenesisv-fos sub-subunit. This is not true in terms of the use of phosphotransferase, CEF and membrane cytophagy. The results showed that the activity of the wild strain v-fos was found to be positive in the presence of acid residues (NDCD2), molecular weight (MW), molecular weight (MW) and acid residue (NDCD2). The wild plant v-fos is located in the center of the plant, and the wild plant GCN4 is in the same level of similarity. NDCD2 spores, fos spores, wild plants v-fos spores, intracellular clot acidification, v-fos spores, fos spores, acid spores, and so on. In the previous year, 2.fos anti-fos antibodies were detected in the previous year, and several antigens other than c-fos antigens in CEF were detected in the previous year. The antigens, the cellular stimuli and the subsequent c-fos colonization stimuli show that the immune response is affected by the immune response, and the importance of the immune mechanism indicates that it is important. The antigens, antigens. The reason for this is that the basic configuration column decides to contain the data in the process of analysis. In the results of the test results, the c-fos system is not known, and the c-fos system is the same as the leucine zippen.