Genomische Klonierung des Sister P-Glykoproteins (spgp) der Ratte und funktionelle Charakterisierung seiner Promotorregion

Der enterohepatische Kreislauf von Gallensäuren ist von entscheidender Bedeutung für die Exkretion cholephiler Substanzen. Der geschwindigkeitsbestimmende Schritt für den Transport monovalenter Gallensäuren vom Blut in die Galle wird durch einen kanalikulären ATP-abhängigen Transporter vermittelt，dessen molekulare Identität bisher unkannt war und der Genfamilie der ATP-binding-cassette（ABC）Transporter zugeschrieben wurde.因此，在哺乳动物中，Sister P-glycoprotein（spgp）的表达是一个非常重要的研究课题。Der Antragsteller konnte durch die vollständige Isolierung und Sequenzierung der cDNA für Rattenleber spgp und den Nachweis von spgp vermitteltem ATP-abhängigem Taurocholat transporters im Baculovirus Expressionssystem estmals die molekulare Identät des kanalikulären Gallensäuretransporters aufdecken.事实上，基因表达的运输系统在基因和病理学上都是控制性的。因此，可以从spgp中分离出基因组DNA，并将spgp基因的5 '侧翼区置于结构上，如启动子、增强子和沉默子韦尔登。对spgp-Gens的transkriptionelle调节将通过Untersuchungen verzedener Stimuli auf die Promotor Aktivität untersucht实现。一个Schwerpunkt bilden bilden在Bedingungen的治疗中出现了胆汁淤积，导致Tiermodell在韦尔登处境下的结果。

Der enterohepatische Kreislauf von Gallensäuren ist von entscheidender Bedeutung für die Exkretion cholephiler Substanzen. Der geschwindigkeitsbestimmende Schritt für den Transport monovalenter Gallensäuren vom Blut in die Galle wird durch einen kanalikulären ATP-abhängigen Transporter vermittelt, dessen molekulare Identität bisher unbekannt war und der der Genfamilie der ATP-binding-cassette (ABC) Transporter zugeschrieben wurde. Wegen seiner ausgeprägten und spezifischen Expression in Lebergewebe galt das sogenannte Sister P-glycoprotein (spgp), von dem ein Teil-cDNA-Klon aus der Schweineleber isoliert wurde als ein hoffnungsvoller Kandidat für den kanalikulären Gallensäuretransporter. Der Antragsteller konnte durch die vollständige Isolierung und Sequenzierung der cDNA für Rattenleber spgp und den Nachweis von spgp vermitteltem ATP-abhängigem Taurocholattransport im Baculovirus Expressionssystem erstmals die molekulare Identität des kanalikulären Gallensäuretransporters aufdecken. Faktoren, die die Genexpression dieses Transportsystems in der gesunden und in der pathologisch veränderten Leber kontrollieren, sind bisher unbekannt. Deshalb soll zunächst genomische DNA vom spgp isoliert und die 5` flankierende Region des spgp Gens auf Strukturelemente, wie den Promotor, Enhancer und Silencer untersucht werden. Die transkriptionelle Regulation des spgp-Gens wird durch Untersuchungen verschiedener Stimuli auf die Promotor Aktivität untersucht. Einen Schwerpunkt bilden Studien über Bedingungen während der medikamenten-induzierten Cholestase, deren Ergebnisse schließlich vom Tiermodell auf die humane Situation umgesetzt werden sollen.