Klonierung und Charakterisierung der 5`-Region des SCA3-Gens: Identifizierung des potentiellen Promotor-Bereichs und Analyse der funktionellen Regulation des Gens

SCA3基因5`区的克隆和表征：潜在启动子区域的鉴定和基因功能调控分析

• 批准号: 5265916
• 负责人: Privatdozentin Dr. Ina Schmitt
• 金额: --
• 依托单位: Klinik und Poliklinik für Neurologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1999-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5265916?language=en
• 关键词: Klonierung; und; Charakterisierung; der; Region

Die spinozerebelläre Ataxie Typ 3 (SCA3), auch bekannt als Machado-Joseph-Erkrankung (MJD), ist eine neurodegenerative Erkrankung, die durch die Verlängerung einer CAG-Wiederholung in der kodierenden Region des SCA3-Gens verursacht wird. Obwohl die SCA3 cDNA-Sequenz bekannt ist, gibt es noch keine Informationen über die genomische Struktur des Gens, den 5'-nichttranslatierten Bereich und den Transkriptionsstartpunkt. Zur Charakterisierung der Transkription und Regulation des SCA3Gens ist jedoch die genaue Kenntnis der Promotor-Region erforderlich. Mit Hilfe der RACE-Technologie ist es möglich, die noch fehlenden Sequenzabschnitte der SCA3-cDNA zu isolieren. Diese Sequenzabschnitte werden als Sonden verwendet, um genomische DNA-Banken zu durchsuchen. Positive Klone sollen subkloniert und sequenziert werden. Die anschließenden Analysen des potentiellen Promotors erfolgen durch Subklonierung entsprechender Sequenzbereiche vor ein Reportergen sowie durch Footprint- und EMSA-Analysen. Die Identifizierung des Promotors, möglicher Bindungsstellen für Transkriptionsfaktoren und regulatorischer Sequenzen verspricht Aufschlüsse über die funktionelle Regulation des SCA3-Gens und bildet die Grundlage für die Erzeugung von Tiermodellen.

脊髓共济失调3型（SCA 3），也可称为Machado-Joseph-Erkrankung（MJD），是一种神经退行性疾病，通过SCA 3-Gens检查区域的CAG-Wiederholung进行验证。尽管SCA 3 cDNA测序已经完成，但它并没有提供任何关于基因组结构的信息，即5 '-nichtentierten Bereich和transkriptionsstartpunkt。SCA 3Gens的转录和调控特点是启动子区的普遍特征。RACE技术的支持是非常重要的，SCA 3-cDNA的测序也是非常困难的。这个序列可以在基因组DNA库中找到。阳性克隆sollen subkloniert和sequenziert韦尔登werden。通过足迹和EMSA分析，潜在启动子的分析通过亚克隆测序或一个报告子进行。Die Identifizierung des Promotors，möglicher Bindungsstellen für Transkriptionsfaktoren und regulatorischer Sequenzen verspricht Aufschlüsse über die funktionelle Regulation des SCA 3-Gens und bildet die Grundlage für die Erzeugung von Tiermodellen.