関節リウマチの滑膜細胞増殖情報伝達機構解明とその制御によるアンチセンス療法開発

阐明类风湿关节炎滑膜细胞增殖信号转导机制并通过其控制开发反义疗法

• 批准号: 08877084
• 负责人: 北島 勲
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877084/
• 关键词: 慢性関節リウマチ; 滑膜細胞; 骨芽細胞; アポトーシス; NF-_KB; AP-1; HVJ-リポソーム法; アンチセンス療法; トロンビン; TNF-α; 細胞内カルシウム; トロンビン受容体; プロテインC; NF-kB

慢性関節リウマチ(RA)患者由来の滑膜細胞と骨芽細胞における腫瘍壊死因子(TNF)による細胞増殖とそのシグナル伝達を解析した。その結果、高濃度(500U/ml)TNFの存在下では、骨芽細胞の細胞増殖は抑制され最終的にはアポトシスが誘導された。一方、滑膜細胞は強い増殖を示した。転写因子活性をゲルシフト法で検討すると、滑膜細胞は非刺激時でNF-_KBが活性化をうけており、骨芽細胞はAP1活性が認められた。アンチセンスNF-_KB,アンチセンスc-junの処理により、NF-_KB活性化はTNF-α刺激による細胞死に対して抑制的に作用していることが明らかになった。また、RAに対するアンチセンス療法を開発するため、アンチセンス核酸やリボザイムを滑膜細胞に導入する方法として、不活性型センダイウイルス(HVJ)-リポソーム法を検討した。その結果、培養細胞において、従来のアニオン型よりもHVJ-カチオン型リポソーム法が細胞内導入効率が高いことが判明した。さらに、本方法を用いてHTLV-I tax mRNA切断リボザイムにより,HTLV-I型関節症の滑膜細胞増殖を抑制することに成功した。以上、当初予定した実験をすべて終了し、滑膜細胞における転写因子の役割と遺伝子治療に対する遺伝子導入法の検討により、期待すべき成果を得ることができた。

Analysis of synovial cells and osteoblasts from patients with chronic arthritis (RA) and tumor necrosis factor (TNF) In the presence of TNF at high concentration (500U/ml), the proliferation of bone bud cells was inhibited and finally induced. A side, synovial cells strong growth The activity of NF-κ B in synovial cells and AP1 in osteoblast cells was determined by the method of transcription. NF-_KB, NF-_KB activation, TNF-α stimulation and inhibition of cell death A method for the development of antiretroviral therapy for RA is described. The results showed that the cell culture efficiency was higher than that of the control group. In addition, this method was successfully used to inhibit the proliferation of synovial cells in HTLV-I arthritis. The results of gene therapy for synovial cells and gene expression factors are discussed and expected.

项目成果

Kitajima,I.,et al.: "Therapeutic application of antisense oligodeoxynucleotides to inflammation" Kyusyu University Press, 171 (1996)

Kitajima,I.,et al.：“反义寡脱氧核苷酸对炎症的治疗应用”九州大学出版社，171（1996）

Kimiyoshi Arimura Isao Kitajima,et al.: "Antibodies to potassium channel of PC12in serum of Isaacs'syndrome" Muscle & Nurve. 20(3). 299-305 (1997)

Kimiyoshi Arimura Isao Kitajima 等人：“艾萨克斯综合征血清中 PC12 钾通道抗体”肌肉

Kitajima,I.,et al.: "Enhanced E-cadherin expression and increased calcium-dependent cell-cell adhesion in human T-cell leukemia virus type I tax expressing PC12 cells" J.Cell.Sci.109. 609-617 (1996)

Kitajima,I.,et al.：“在人 T 细胞白血病病毒 I 型表达 PC12 细胞中增强 E-钙粘蛋白表达并增加钙依赖性细胞粘附”J.Cell.Sci.109。

Watanabe,O.,et al.: "Greatly raised vascular endothelial growth factor(VEGF)in POEMS syndrome." Lancet. 347. 702-702 (1996)

Watanabe,O.,et al.：“POEMS 综合征中血管内皮生长因子 (VEGF) 显着升高。”

Isao Kitajima Naohiro Hanyu et al.: "Ribozyme-based gene cleavage approach to chronic arthritis associated with human T-cell leukemia virus type I(HTLV-I)" Arthritis & Rheumatism. 40. 2118-2127 (1997)

Isao Kitajima Naohiro Hanyu 等人：“基于核酶的基因切割方法治疗与人类 T 细胞白血病病毒 I 型 (HTLV-I) 相关的慢性关节炎”