細胞ストレスに伴うがん抑制タン白p53の核内集積機構の解明

阐明与细胞应激相关的肿瘤抑制蛋白p53的核积聚机制

• 批准号: 08878126
• 负责人: 山泉 克
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08878126/
• 关键词: p53蛋白; 細胞ストレス; DNA損傷; 誘導調節

熱ショック、浸透圧ショック等の細胞ストレスにより、p53蛋白の核内増加が起こる。p53蛋白のこのような核内増加はDNA障害等によっても起こることが既に報告されている。但し後者の場合にはp53増加後、サイクロヘキシミドを加えてもその後の量の減少がほとんど認められないことから、p53蛋白の分解系に抑制がかかるために起こる現象とされている。それに対し、細胞ストレス後のp53蛋白量は、サイクロヘキシミドを加えると速やかに減少することから、別のメカニズムによる可能性が考えられた。まず転写レベルでの調節かどうかを見るため、熱ショックや、浸透圧ショック後のp53mRNA量をRT-PCR法で定量的に調べたところ、p53mRNA量には変化がないことがわかった。次に合成後のp53蛋白の細胞内安定性を見るため、細胞を^<35>S-メチオニンで1時間ラベルし、熱ショックを加える群と加えない群にわけ、ラベルされたp53蛋白量の変化を免疫沈降法で調べた。熱ショックを加えない群ではラベルされたp53量が速やかに減少するのに対し、熱ショックを加えた群では少なくとも2時間後までは分解が抑制されていることがわかった。以上の結果は、熱ショックを加えることにより、極めて一過性にp53蛋白の分解抑制が起こるが、p53量が最大値になる時点ではこの抑制が解除されていることを示す。現在浸透圧ショックの場合にも同様な機構が働いているかどうかを検討している。一方、p53集積機構の引き金として、我々は転写阻害を考えているが、熱ショックや浸透圧ショックに伴い、p53の増加に先行して一過性にRNA合成が低下することを明らかにした。

The increase of p53 protein in the nucleus of cells such as heat exchanger, osmotic pressure exchanger, etc. The p53 protein was found to increase in DNA damage in the nucleus. However, in the latter case, after the increase of p53 protein, the decrease of p53 protein content after the increase of p53 protein, the decomposition of p53 protein was inhibited. The possibility of increasing and decreasing the amount of p53 protein in cells was examined. p53 mRNA quantity was quantified by RT-PCR after the regulation of p53 mRNA by RT-PCR. The intracellular stability of p53 protein after synthesis was observed, and the cellular stability of <35>p53 protein was regulated by immunoprecipitation method. In addition, the amount of p53 in the heat treatment group is reduced. In addition, the amount of p53 in the heat treatment group is reduced. After 2 hours, the heat treatment group is reduced. The results showed that the inhibition of p53 protein decomposition was transient and the inhibition of p53 protein decomposition was released. Now, in the case of penetration, the same mechanism is used. On the other hand, the increase of p53 accumulation mechanism leads to the decrease of RNA synthesis due to the increase of heat and saturation pressure.

项目成果

Tateishi, S.: "Cell cycle control is aberrant in Chinese hamster ovary cell mutants exhibiting apoptosis after serum deprivation" Somatic Cell and Molecular Genetics. 23(5). 313-323 (1998)

Tateishi, S.：“中国仓鼠卵巢细胞突变体的细胞周期控制异常，在血清剥夺后表现出细胞凋亡”《体细胞和分子遗传学》。

Nitta, M.: "He at shock induces transient p53-independent cell cycle arrest at G1/3" Oncogene. 15(5). 561-568 (1997)

Nitta, M.：“休克时的 He 会诱导 G1/3 处短暂的 p53 依赖性细胞周期停滞”Oncogene。

Masaru Yamaizumi: "Heat shock induces transient p53-independent cell cycle arrest at G1/S" Oncogene. (in press).

Masaru Yamaizumi：“热休克诱导 G1/S 时短暂的 p53 独立细胞周期停滞”Oncogene。