神経細胞のアポトーシスにおけるc-fos,c-junの役割-遺伝子操作マウスにおける検討-

c-fos 和 c-jun 在神经元凋亡中的作用 - 基因工程小鼠的研究 -

• 批准号: 08878142
• 负责人: 仙波 恵美子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08878142/
• 关键词: アポトーシス; c-fos; ノックアオウト・マウス; トランスジェニック・マウス; インターフェロン; インターフェロン受容体; ニューロン; 中脳ドーパミンニューロン; 小脳顆粒細胞; c-jun; トランスジェニック; マウス

遺伝子操作動物を用いて、c-fos,c-junなどの細胞性癌遺伝子の発現の過剰あるいは欠如が、ニューロンの生存に与える影響を検討し、これらの細胞性癌遺伝子がapoptosisの誘導にどのような役割を果たすかということを明らかにするのが、本研究の目的である。今年度は主に、c-fos transgenic mouse(MX-c-fosD)を用いて、c-fosの過剰発現による影響を検討した。このマウスはinterferon(INF)-α/βの刺激により誘導されるMx proteinのpromoterをc-fos遺伝子にligateして作製されたものであり、INF-α/βを作用させると、INF-α/βに対するリセプターを有する細胞例えばBリンパ球においてc-fosの過剰発現が見られることが、共同研究社の徳久らにより確認されている。本年度は以下のような成果が得られた。(1)slot blotによるtransgenic mouseのホモ・ヘテロとwildの判別法の改善を行った。(2)神経系の細胞のうちどれがINF-α/β刺激に反応してc-fosを過剰発現するかということを明らかにするため、INF-αおよびINF-α/βリセプターの産生と局在について、in situ hybridization法および免疫組織化学によりマウスとラットの脳で検討した。これまで、ヒトでの検討ではミクログリアに発現しているとされているが、我々のマウス・ラット脳での検討では、中脳黒質周辺のTH陽性ニューロン(多くはA10細胞群で、一部はA8やA9の細胞も含んでいる)がINF-リセプターを発現することがわかった(投稿準備中)。脳でのINF-リセプターの存在についてはWestern blottingでも確認している。今後、いずれの細胞がINF-リセプターを発現しているかということについて、上記のtransgenicmouseからとったニューロン/astrocyte/ミクログリアをそれぞれ別々に培養し、INF-α/βを添加することによりc-fos過剰発現がみられるか否かを検討する。(3)PC12細胞においてNGF非添加によりアポトーシスを誘導する系を確立した。これらの細胞に抗c-Fos抗体を作用させた時の細胞の生存について検討する予定である。

Heritage 伝 を sub operations animals with い て, c fos, c - jun な ど の cell carcinoma heritage 伝 son の 発 is の through turning あ る い は owe such as が, ニ ュ ー ロ ン の survival に and え る influence を beg し 検, こ れ ら の cell carcinoma heritage 伝 son が apoptosis induced に の ど の よ う な "を cut fruit た す か と い う こ と を Ming ら か に す る の が, this research The purpose of this study is である. This year, the <s:1> main に and c-fos transgenic mouse(MX-c-fosD)を used the <s:1> て and c-fos <s:1> to develop による influence を検 to seek た た. <s:1> ウス ウス ウス interferon(INF)-α/β <s:1> stimulation によ によ induces されるMx C - fos protein の promoter を heritage 伝 son に ligate し て cropping さ れ た も の で あ り, INF - alpha/beta を さ せ る と, INF - alpha/beta に す seaborne る リ セ プ タ ー を have す る cell cases え ば B リ ン パ ball に お い て c - fos の through turning 発 が now see ら れ る こ と が and common research society の Howard Jiu らによ らによ confirm されて されて る る. For the current year, the following ような ような achievements が obtain られた. (1) slot blot に よ る transgenic mouse の ホ モ · ヘ テ ロ と wild の の discriminant method to improve line を っ た. Cells (2) god 経 の の う ち ど れ が INF - alpha/beta stimulus に anti 応 し て - c fos を before turning 発 now す る か と い う こ と を Ming ら か に す る た め, INF alpha お よ び INF - alpha/beta リ セ プ タ ー の produce と bureau in に つ い て, in situ hybridization method および immunohistochemistry によ ウスとラット ウスとラット 脳で検 脳で検 for <s:1> た. こ れ ま で, ヒ ト で の beg で 検 は ミ ク ロ グ リ ア に 発 now し て い る と さ れ て い る が, I 々 の マ ウ ス · ラ ッ ト 脳 で の beg で 検 は, 脳 in black mass weeks 辺 の TH positive ニ ュ ー ロ ン (く は で A10 cell populations, a は A8 や A9 も の cells contain ん で い る) が INF - リ セ プ タ ー を 発 now す る こ と が わ か っ た (Submission preparation in progress) Youdaoplaceholder0 <s:1> INF-リセプタ リセプタ リセプタ る 脳で the presence of に 脳で て て て る Western blottingで で confirms that て て る る. In the future, い ず れ の cells が INF - リ セ プ タ ー を 発 now し て い る か と い う こ と に つ い て, written の transgenicmouse か ら と っ た ニ ュ ー ロ ン astrocyte / ミ ク ロ グ リ ア を そ れ ぞ れ don't 々 に し, INF - alpha/beta を add す る こ と に よ り c - fos through turning 発 now Youdaoplaceholder0 no を検 ask for する. (3)PC12 cells にお にお てNGF without the addition of によ アポト シスを シスを シスを シスを induced する line を establishment of た た. The <s:1> れら <s:1> <s:1> cell に anti-c-fos antibody を acts on させた, and the <s:1> cell <s:1> survival に する て検 て検 て検 て検 て検 て検 て検 て検 て検 する is determined である.

项目成果

Okada, Y.etal.: "Immunolocalization of proto-oncogene products in keratocytes after epithelial ablation, alkali burn and penetrating injury of the cornea in rats" Graef Arch Clin Exp. (in press).

Okada, Y.etal.：“大鼠角膜上皮消融、碱烧伤和穿透性损伤后角膜细胞中原癌基因产物的免疫定位”Graef Arch Clin Exp。

Senba, E. and Kashiba, H.: "Sensory afferent processing in multi-responsive DRG neurons" Progress in Brain Res.113. 387-410 (1996)

Senba, E. 和 Kashiba, H.：“多响应 DRG 神经元中的感觉传入处理”《Brain Res.113》进展。

Kawai, Y and Senba, E.: "Noradrenaline-mediated lateral inhibition in the sympathetic ganglion" Neurosci.Lett.238. 87-89 (1997)

Kawai, Y 和 Senba, E.：“交感神经节中去甲肾上腺素介导的侧向抑制”Neurosci.Lett.238。

Senba, E.and Ueyama, T.: "Stress-induced expression of immediate early genes in the brain and peripheral organs of the rat" Neurosci. Res.29. 183-207 (1997)

Senba, E. 和 Ueyama, T.：“应激诱导的大鼠大脑和外周器官中早期基因的表达” Neurosci。

Umemoto, S.et al.: "Chronic glucocorticoid administration affects the subsequent acute immobilization stress-induced expression of IEGs but NGFI-A" Neuroscience. 80. 763-773 (1997)

Umemoto, S.et al.：“慢性糖皮质激素给药会影响随后的急性固定应激诱导的 IEG 表达，但会影响 NGFI-A”神经科学。