球脊髄性筋萎縮症特異的ｉＰＳ細胞を用いた病態解析

使用脊髓延髓肌萎缩症特异性 iPS 细胞进行病理分析

• 批准号: 13J00237
• 负责人: 下門 大祐
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J00237/
• 关键词: 疾患特異的iPS細胞; 球脊髄性筋萎縮; 神経筋接合; 球脊髄性筋萎縮症; ヒト人工多能性幹細胞; 運動ニューロン; 骨格筋; 神経筋結合; 球脊髄性筋萎縮症(SBMA); non-cell autonomous

球脊髄性筋萎縮症の患者4名より疾患特異的iPS細胞を各患者につき複数クローンずつ樹立し、その品質評価を行った。続いて、効率的かつ迅速な運動ニューロンの分化誘導系を構築した。また、運動ニューロンに特異的に発現する遺伝子であるHB9のレポーターシステムを構築し、きわめて効率の高い運動ニューロンの標識および純化方法を構築した。また、hMyoD1遺伝子の導入により、効率の高い骨格筋の分化誘導系を構築した。次に、疾患特異的iPS細胞より運動ニューロンを誘導し、遺伝子発現を解析する事により、先行研究でも認められた、VEGFシグナルの異常が軽微ながら認められた。CGRP1の発現亢進とそれに伴うc-Junのリン酸化も観察され、初期の病態が再現出来たと考えられるが、発症の直接的な原因と考えられるアンドロゲン受容体の凝縮体形成やリガンド依存的な細胞死は観察出来なかった。これは先に見られた病態が、比較的初期の軽微な病態を反映しているためと考えられる。今後は薬剤によって加齢等による運動ニューロンへのストレスを再現し、より顕著な病態を観察する予定である。次に、運動ニューロンと骨格筋にそれぞれ生じる病態が協奏的に球脊髄性筋萎縮症の病態を形成する可能性を考え、運動ニューロンと骨格筋の共培養系を構築を試みた。先の方法によって誘導した運動ニューロンは骨格筋に対して投射する能力を持ち、蛇毒であるブンガロトキシンによって認識される機能的な神経筋接合を形成した。現在、神経近接合をリアルタイムにイメージングする手法を構築している。

Four patients with spinal dystrophy were selected for the disease-specific iPS cells. The differentiation induction system of rapid movement and efficiency is constructed. The identification and purification method of HB9 was constructed by the method for the identification and purification of HB9 and HB9. Construction of differentiation induction system for high efficiency and high efficiency of introduction of hMyoD1 gene In addition, disease-specific iPS cells were induced to move, and the expression of VEGF was analyzed. CGRP1 expression is hyperactive, accompanied by c-Jun activation, early pathological reappearance, direct cause of CGRP1 expression, receptor condensation, dependent cell death, and detection. This is the first time that we have seen the disease, the initial stage of comparison, and the initial stage of the disease. In the future, we will continue to improve the quality of our products. Secondly, we will examine the possibility of the formation of the pathology of spinal cord atrophy due to the coexistence of sports and bones and tendons, and try to build a co-cultivation system of sports and bones and tendons. The prior art method of inducing muscle movement was used to form muscle joints. Now, in the near future, we will construct a new method of communication.

项目成果

iPS細胞を用いたニューロマスキュラーパソロジーの解析

使用 iPS 细胞分析神经肌肉病理学

• 发表时间: 2015
• 作者: 下門大祐;小野寺一成;勝野雅央;祖父江元;岡野栄之;岡田洋平
• 通讯作者: 岡田洋平

Rapid, efficient, and simple motor neuron differentiation from human pluripotent stem cells.

• DOI: 10.1186/s13041-015-0172-4
• 发表时间: 2015-12-01
• 期刊: Molecular brain
• 影响因子: 3.6
• 作者: Shimojo D;Onodera K;Doi-Torii Y;Ishihara Y;Hattori C;Miwa Y;Tanaka S;Okada R;Ohyama M;Shoji M;Nakanishi A;Doyu M;Okano H;Okada Y
• 通讯作者: Okada Y

Pathophysiological Analysis of Spinal-Bulbar Muscular Atrophy with Induced Pluripotent Stem Cells

诱导多能干细胞脊髓延髓肌萎缩症的病理生理学分析

• 发表时间: 2014
• 作者: K. Sekizawa;K. Yabana;榧木亨;下門大祐
• 通讯作者: 下門大祐