Die Rolle der DNA-Methylierung und der DNA-Methyltransferase bei der zerebralen Ischämie

DNA-(cytocin -5)-甲基转移酶（MTase， E.C. 2.1.1.37）的催化作用及基因表达调控。Beim Schlaganfall kommt es zu DNA-Schäden sowie Genexpressionsveränderungen。基因与疾病的关系：基因与疾病的关系：基因与疾病的关系：基因与疾病的关系：基因与疾病的关系：基因与疾病的关系：基因与疾病的关系：基因与疾病的关系Mittels transgener Mäuse, denen (a)构成序(b)条件神经元dna -甲基转移酶（dnmt） fehlt and die somit weniger MTase exprieren, soll (II) gezeigt werden, daseine Verringerung der mase - spiegel zu veränderten Methylierungsmustern nach Schlagangall fhrt und daseese Tiere vor Schlaganfall geschtzt sind。[1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1]第三章：神经保护机制的研究。(a) genexpressionsstuden (mittelels subtraktiver Hybridisierung der DNA microchips) sollen festellen, ob veränderte Methylierungsmuster zu Transkriptionsveränderungen f<s:1> hren（表观遗传理论）。(b) Zum anderen soletestest werden; (b) Zum anderen soletestest werden；诱变剂；诱变剂；遗传学研究与chip - mutantten（遗传理论）。Unsere Untersuchungen könnten somit erstmals einen Einfluß der DNA-Methylierung bei einer akuten Erkrankung nachweisen, was wegweisend f<e:1> r andere Krankheitsbilder wäre （z.B. Inflammation, Schock， Organischämie等）。

Die DNA-Methylierung wird durch das Enzym DNA-(Cytosin-5)-Methyltransferase (MTase, E.C. 2.1.1.37) katalysiert und ist wichtig für die Regulierung der Genexpression. Beim Schlaganfall kommt es zu DNA-Schäden sowie Genexpressionsveränderungen. Gegenstand diese Antrages soll deshalb (I) sein zu untersuchen, ob sich nach zerebraler Ischämie die Expression und Aktivität der MTase sowie die Methylierungsrate in vivo ändern. Mittels transgener Mäuse, denen (a) konstitutiv oder (b) konditionalneuronal das DNA-Methyltransferasegen (dnmt) fehlt und die somit weniger MTase exprimieren, soll (II) gezeigt werden, daß eine Verringerung der MTase-Spiegel zu veränderten Methylierungsmustern nach Schlagangall führt und daß diese Tiere vor Schlaganfall geschützt sind. Somit würde erstmals ein unmittelbarer Zusammenhang zwischen DNA-Methylierung und Ischämieschaden nachgewiesen werden. Im weiteren (III) soll der neuroprotektive Mechanismus erarbeitet werden. (a) Genexpressionsstudien (mittels subtraktiver Hybridisierung oder DNA Mikrochips) sollen feststellen, ob veränderte Methylierungsmuster zu Transkriptionsveränderungen führen (epigenetische Theorie). (b) Zum anderen soll getestet werden, ob die MTAse einen direkten (ggf. mutagenen) Einfluß auf den Zellschaden hat; u.a. mittels Gendosis Wirkungsstudien an CHIP-Mutanten (genetische Theorie). Unsere Untersuchungen könnten somit erstmals einen Einfluß der DNA-Methylierung bei einer akuten Erkrankung nachweisen, was wegweisend für andere Krankheitsbilder wäre (z.B. Inflammation, Schock, Organischämie etc.).