13C標識アミノ酸法によるたんぱく質耐容上限量の推定に関する基礎研究

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近年ではアミノ酸やプロテインを主としたサプリメントが普及し、筋肉量を増やしたいと考える人が多量に摂取する事例が多い。しかしながらタンパク質の過剰摂取によるタンパク質代謝の変化を検討した報告は少なく、日本人の食事摂取基準（2020年版）では、タンパク質の耐容上限量は設定されていない。13C標識アミノ酸法は、炭素の安定同位体13Cで標識したアミノ酸を経口摂取して、呼気に排出される13CO2量を測定して体内のアミノ酸代謝をみる方法である。13C標識アミノ酸法の一つである直接アミノ酸酸化（direct amino acid oxidation; DAAO）法を用いて、タンパク質代謝上限量の推定法を検討することを目的とした。6週齢のSD系雄性ラットを、12時間明暗サイクル（明期 20:00～08:00）、温度22 ± 2℃で飼育した。20％カゼイン食を自由摂食とした状態で、1週間予備飼育した。7～8週齢のラットを用いてDAAO法を実施した。DAAO法の実験日には、実験食として40%、50%、55%、60%または70%カゼイン食を用いた。一定量の空気を継続的に送り込んだ状態のチャンバーに、実験前夜よりラットを入れ、一晩、絶食させた。当日は9時より1時間毎に平均1日摂食量の1/12量の実験食を計10回自由摂食させた。DAAO法に用いた実験食には、標識アミノ酸としてL-[1-13C]フェニルアラニンを各実験食中のカゼインに含まれるフェニルアラニンの10%量を混餌した。9時から19時まで1時間毎にチャンバー内の気体を呼気サンプルとして呼気採取バッグに採取し、赤外分光分析装置により呼気中の13CO2量を測定した。現在、結果の解析中である。