权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

制御性T細胞エピゲノム：形成機構の解明とリプログラミング仮説の検証

调节性T细胞表观基因组：阐明形成机制并验证重编程假说

基本信息

批准号：
22K19422
负责人：
堀昌平
金额：
$ 4.16万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19422/
关键词：
制御性T細胞細胞分化遺伝子発現制御エピゲノム T細胞受容体

项目摘要

1．TCRシグナルによるTET依存的TSDR脱メチル化メカニズムの解明我々はこれまでに、末梢ナイーブCD4 T細胞をTGF-betaとIL-2存在下でTCR刺激することでFoxp3発現を誘導するin vitro分化系を用い、TCRシグナルがmTORC1とDNA脱メチル化酵素TET2/3を介してTreg固有のエピゲノム（Foxp3遺伝子座のTSDR領域のDNA脱メチル化）を誘導することを見いだしている。本年度、TCR-mTORC1経路がTET2/3発現をタンパク質レベルで増加させることでTSDR脱メチル化を促進することを明らかにした。そして、T細胞特異的Raptor欠損マウスを用いて、TET2/3のタンパク質発現とTSDR脱メチル化がRaptor依存的であることを確認した。さらに、Raptor欠損マウスの末梢Foxp3+CD4+ T細胞ではTSDR脱メチル化の程度が低下していることを示し、mTORC1 (Raptor)依存的なTSDR脱メチル化機構が生体内においても働くことが示唆された。2．Tregエピゲノムレポーターマウスの作製・解析Foxp3 TSDR脱メチル化依存的にGFPCre融合タンパク質が発現するBACトランスジェニックマウス（Tregエピゲノムレポーターマウス）の作製を進め、ファウンダーマウスを複数得た。しかしながら、末梢血中のTregにおいて、Foxp3 BAC transgeneの転写レポーター（Thy1.1）の発現は検出されたものの、TSDR脱メチル化依存的に発現するGFPの発現は検出されなかった。脱メチル化TSDR依存的にGFPCreの発現をドライブするSnrpnプロモーターがTregでは作動していないと考えられ、このストラテジーでのレポーターマウスの作製は中断し、Tregでも作動する刷り込み遺伝子のプロモーターを探索することとした。

1.TCR is sensitive to TET-dependent TSDR deconstructionalization. It is clear that we have TCR stimulation in the presence of TGF-beta IL-2 in the presence of in vitro T cells, in vitro T cells, and in vitro differentiation lines. TCR system, mTORC1, DNA, enzyme TET2/3, Treg, Foxp3, TSDR, DNA, DNA, TSDR, etc. This year, the TCR-mTORC1 road TET2/3 will improve the performance of the TSDR system. For example, the Raptor of the cell is not valid. The TET2/3 is not valid. The TSDR is deactivated. The Raptor dependency is confirmed. In the Foxp3+CD4+ T cell, there is a low degree of TSDR degradation, and the mTORC1 (Raptor)-dependent TSDR exfoliation mechanism is used to indicate that the system is instigated. In the 2.Treg system, we need to analyze the data of Foxp3 TSDR deconstructionalization. We need to analyze the data of GFPCre fusion. We can see that the data of the BAC fusion is different from that of the GFPCre. This is the first step in the analysis of BAC data. In the peripheral blood, Treg was detected, Foxp3 BAC transgene was written in the peripheral blood (Thy1.1), and TSDR was released from the dependency. GFP was detected in the peripheral blood. To realize the TSDR dependency, you need to know that the Snrpn operation is not valid. The Treg operation is not valid. The operation is interrupted. The Treg operation is interrupted. The Treg operation is broken.