in vitro表現系解析を基にしたマラリア原虫アルテミシニン耐性機構の解明

基于体外表型系统分析阐明疟原虫青蒿素耐药机制

• 批准号: 22KJ2743
• 负责人: 池田 美恵
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2743/
• 关键词: アルテミシニン耐性; ウガンダ; Kelch13; 定量RSA; マラリア; 薬剤耐性疫学; in vitro; ex vivo; kelch 13; 原虫生存率; RSA; 熱帯熱マラリア原虫; 耐性レベル; MIC1%; LD50; 定量的RSA; アフリカ

本年度は、主に現地から持ち帰った原虫凍結ストックからの耐性原虫株の確立、現地において定量RSA (qRSA)を用いた調査を実施した。凍結原虫ストックは、2018年ウガンダ採取サンプルを対象としアルテミシニン耐性原因責任遺伝子であるKech13の野生型、耐性であるA675V型、現在現地でマジョリティとなっているC469Y型、それぞれの培養を実施、最終的に野生型、変異型それぞれの培養クローン株化に成功した。耐性株のクローン化過程において、必ずしも得られるクローンは集団内のマジョリティではないという新たな知見を得た。変異型原虫において、現地サンプルでのKelch13遺伝子型は純粋な変異型であり、培養株化過程においても野生型の混入は一切見られなかったが、クローン化後得られた株の遺伝子型は5クローン中4クローンが野生型であり変異型は1クローンのみであった。おそらくシークエンス上ではほとんど検出されないKelch13野生型原虫がlimiting dilutionでのクローン化によって顕在化したと考えられる。ウガンダでの疫学調査は、既にART耐性が出現しているウガンダ北部における集団レベルでのアルテミシニン耐性の変化を明らかにするため実施した。qRSAを用いた調査によって104サンプルを得た。増殖不良や薬剤時間のミスなどがあったサンプルは除外し、67サンプルのデータを、in vivoアルテミシニン耐性出現以前である2014年-2015年のデータと比較した。その結果、耐性出現以前と出現後では集団全体のART耐性レベルは変化していないことが明らかになった。また、新たに現地において耐性型のマジョリティが初期に出現したA675V型からC469Y型に変化しているが、RSAレベルの耐性はC469Y型は野生型と変わらないという興味深い結果を得た。

This year, the establishment and quantitative RSA (qRSA) survey of resistant protozoa was carried out. Freezing protozoa, 2018, adopted the wild type of Kech13, resistant type A675V, and now the wild type C469Y, culture and final wild type, heterotypic culture and successful isolation. In the process of transformation, the plant must be able to understand the new situation. The mutant protozoa is isolated from the wild type and the mutant protozoa is isolated from the wild type. Kelch13 wild-type protozoa is a limiting dilution. The study of ART-related diseases was carried out in the early stages of development of ART-related diseases. qRSA is used to investigate 104 cases. In 2014 - 2015, the number of cases before the occurrence of the disease was 67. The number of cases before the occurrence of the disease was 67. Before and after the emergence of tolerance, the ART tolerance of the whole group was collected. In the early stage, A675V type, C469Y type, RSA type, and wild type appeared.

项目成果

Efficacy of piperaquine drug in Gulu Northern Uganda

哌喹药物在乌干达北部古卢的疗效

• 发表时间: 2023
• 作者: Betty Balikagala,Naoko Yoshida;Mie Ikeda;Naoyuki Fukuda;Makoto Hirai;Denis AAnywar;Osbert T Katuro;Gerald Odong;Eisaku Kimura;Nirianne M Q Paracpac;Martin Ogwang;Emmanuel I Odongo-Aginya;Toshihiro Horii;Toshihiro Mita.
• 通讯作者: Toshihiro Mita.

St Mary's Hospital Lacor/Gulu University(ウガンダ)

拉科尔圣玛丽医院/古鲁大学（乌干达）

Isolation of Mutants With Reduced Susceptibility to Piperaquine From a Mutator of the Rodent Malaria Parasite Plasmodium berghei.

• DOI: 10.3389/fcimb.2021.672691
• 发表时间: 2021
• 期刊: Frontiers in cellular and infection microbiology
• 影响因子: 5.7
• 作者: Ikeda M;Hirai M;Tachibana SI;Mori T;Mita T
• 通讯作者: Mita T

ウガンダ北部における熱帯熱マラリア原虫アルテミシニン感受性調査

乌干达北部恶性疟原虫青蒿素敏感性调查

• 发表时间: 2022
• 作者: 池田 美恵;吉田 菜穂子;Betty Balikagala;平井 誠;福田 直到;Osbert Katuro;Dennis Anywar;Nirianne Palacpac;Emmanuel Aginya;木村英作;堀井俊宏;美田敏宏
• 通讯作者: 美田敏宏

Gulu University/St Mary's Hospital Lacor(ウガンダ)

古鲁大学/拉科尔圣玛丽医院（乌干达）