細胞分裂を行う蛋白質,PBP-3,のプロセシングとその機能発現の研究

负责细胞分裂的蛋白质PBP-3的加工及其功能表达的研究

• 批准号: 60214035
• 负责人: 広田 幸敬
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60214035/
• 关键词: PBP-3; リポ蛋白質; ペプチド開裂; ペニシリン結合蛋白質; 膜蛋白質

大腸菌のペニシリン結合蛋白質(PBP-3)は細胞分裂を行なう膜蛋白質であり、またβ-ラクタム系抗生物質の致死標的であるという、重要な生物活性をもった蛋白質である。われわれはPBP-3の構造遺伝子、ftsIの全塩基配列を決定し、ftsIDNAからPBP-3をIn vitro合成させることに成功した。その結果、ftsIのコーディング領域は1762塩基対からなり、それがコードしてデきるPBP-3分子は、全588アミノ酸残基を含み、その分子量は63.8Kであることをあきらかにした。このPBP-3はリポ蛋白質である。まずその前駆体(P1)として合成される。P1の30番システイン残基がグリセリド修飾をうけた後に29番グリシン残基との間でペプチド開裂をうけ、さらにそのN【H_2】基が脂肪酸修飾をうけて成熟PBP-3(M)となることを発見した。しかもこの反応過程はP1-PBP-3が内膜を通過するトランス・ローケーションの過程を共 して行われる。そのハーフ・ライフは2.5分〜3分であった。この過程はsecAとsecY遺伝子産物に上るトランス・ローケーションをうけて成熟し、その作用を発現することを見出した。この反応過程は抗生物質、グロボマイシンによる阻害をうけないことを発見したが、これはブラウンのリポ蛋白質のプロセシング反応と異るシグナルペプチデースによって行われることをしめした。さらにPBP-3分子とペニシリン分子との分子反応の過程を明らかにした。すなわちPBP-3の307番のセリン残基の-OHがペニシリンと反応する活性中心で、ペニシリンと-CO-O-Serの共有結合がつくられることを明らかにした。以上の結果は、307番セリンをヌクレオタイド・ディレクテッド・サイトスペシフィッ・ミュタジェネシスによって、307番スレオニン、あるいは307番アラニンで置換した変異PBP-3はペニシリン結合活性を失い、その機能も失う結果と、完全に一致する。

Coliform の ペ ニ シ リ ン binding protein (PBP - 3) は cell division line を な う membrane protein で あ り, ま た beta ラ ク タ ム is antibiotic substances の death mark で あ る と い う, な important bioactive を も っ た protein で あ る. わ れ わ れ は PBP - 3 の tectonic heritage 伝, ftsI の salt base full を decided し, ftsIDNA か ら PBP - 3 を the In vitro synthesis さ せ る こ と に successful し た. そ の results, ftsI の コ ー デ ィ ン グ field は 1762 salt base ain か ら な り, そ れ が コ ー ド し て デ き る molecular は PBP - 3, 588 ア ミ ノ acid residues を み, そ の は molecular weight 63.8 K で あ る こ と を あ き ら か に し た. <s:1> <s:1> PBP-3 リポ リポ protein である. Youdaoplaceholder0 the まずそ precursor 駆 (P1)と て て synthesizes される. P1 の 30 times シ ス テ イ ン residues が グ リ セ リ ド modified を う け た に after 29 times グ リ シ ン residues と の between で ペ プ チ ド cracking を う け, さ ら に そ の N が modified fatty acid H_2 】 【 を う け て mature PBP - 3 (M) と な る こ と を 発 see し た. し か も こ の anti 応 process は P1 - PBP - 3 が lining を through す る ト ラ ン ス · ロ ー ケ ー シ ョ ン を altogether し の process line て わ れ る. Youdaoplaceholder0 そ ハ フ フ フ · ラ フ フ ハ 2.5 to 3 points であった. こ の process は secA と secY heritage 伝 zi chan content on に る ト ラ ン ス · ロ ー ケ ー シ ョ ン を う け て mature し, そ の role を 発 now す る こ と を shows し た. こ の は 応 process of antibiotic substances, グ ロ ボ マ イ シ ン に よ る resistance against を う け な い こ と を 発 see し た が, こ れ は ブ ラ ウ ン の リ ポ protein の プ ロ セ シ ン グ anti 応 と different る シ グ ナ ル ペ プ チ デ ー ス に よ っ て line わ れ る こ と を し め し た. Youdaoplaceholder0 PBP-3 molecule とペニシリ とペニシリ molecule と <s:1> molecule anti応 <e:1> process を bright ら らに た た す な わ ち PBP - 3 の 307 times の セ リ ン residues の - OH が ペ ニ シ リ ン と anti 応 す る active center で, ペ ニ シ リ ン と - CO - O - Ser の mutual combination が つ く ら れ る こ と を Ming ら か に し た. の は, 307 times above セ リ ン を ヌ ク レ オ タ イ ド · デ ィ レ ク テ ッ ド · サ イ ト ス ペ シ フ ィ ッ · ミ ュ タ ジ ェ ネ シ ス に よ っ て, 307 times ス レ オ ニ ン, あ る い は 307 times ア ラ ニ ン で replacement し た - different PBP - 3 は ペ ニ シ リ ン combined with active を い loss, そ の function も う results と loss, completely consistent に す る .

项目成果

J.Mol.Biol.184. (1985)

J.Mol.Biol.184。

J.Bacteriol. 164. (1985)

J.细菌。

Mol.Gen.Genet.200. (1985)

Mol.Gen.Genet.200。

Mol.Gen.Genet.201. (1985)

Mol.Gen.Genet.201。

Biochemistry. 24. (1985)

生物化学。