アルドラーゼ遺伝子のクロマチン構造と発現制御

醛缩酶基因染色质结构及表达调控

• 批准号: 60224001
• 负责人: 堤 賢一
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60224001/
• 关键词: クロマチン; 遺伝子高次構造; 核蛋白質

アルドラーゼB遺伝子の発現調節機構に関する情報を得るために、本遺伝子のメチレーション、クロマチン構造の解析、および5′上流域に結合する蛋白の検索を行い次のことがわかった。1.成体組織ではcap site付近から5Kb下流にかけての領域の低メチル化(Hpa【II】およびHha【I】サイト)と発現との相関がみられた。本遺伝子の発現の低い胎仔肝やガン細胞ではこの領域のメチル化の程度は高い。2.発現型のクロマチンは非発現型のそれに比べてDNaseに攻撃されやすい、ゆるんだ構造をとっている。また、cap site上流域0.2Kb付近は、発現型のクロマチン上でのみ高感受性領域となっていた。しかし、この領域は、発現の非常に低い胎仔期肝においてもすでに高感受性を示す構造となっていた。3.5′上流域に結合する核蛋白をFilter binding assayおよびProtein blotting法で検索した結果、肝の-2.6Kb(サイト【I】)および-0.2Kb(サイト【II】)の2ヶ所のDNase高感受性領域近傍(0.4〜0.8Kb以内)に結合する蛋白が肝核中に存在した。サイト【I】付近に結合する蛋白は分子量42K,サイト【II】に結合するのは分子量45Kと35Kの2種であった。これらの蛋白は高感受性を示さない脳には存在しない。しかし、サイト【II】には95Kの蛋白が結合することがわかった。これらの結果から本遺伝子の発現には、クロマチンの構造的制約が関与すること、またその特異構造の構築には組織特異的な蛋白が関与するらしいことが示唆された。また、肝の発生過程では転写か活性化する以前に活性型クロマチン構造の構築は完了しており、遺伝子の脱メチル化は転写活性化と同時あるいはそれ以後におこることが考えられた。さらに、以上の結果は、活性型クロマチン構造に作用する何らかの転写促進因子の存在が本遺伝子の発現に必須であることを示す。

The information on the expression of protein in the protein is obtained, the expression of protein in the protein is analyzed, and the expression of protein in the upper 5 'region is analyzed. 1. The adult tissue is close to the cap site and the lower part of the field is low in concentration (Hpa [II] and Hha [I]). The development of this gene is low in fetal liver cells, but the degree of differentiation in this field is high. 2. Emergent type of DNA attack and non-emergent type of DNA attack. 0.2Kb in the upper basin of the cap site, and the upper basin of the cap site, and the upper basin of the upper basin of the cap site. This domain is very low in fetal life and high in susceptibility. Filter binding assay and Protein blotting method were used to detect the binding protein in the 3.5′ upper basin. The binding protein was found in the liver nucleus near the DNase high sensitivity domain (within 0.4 ~ 0.8Kb) of-2.6Kb([I]) and-0.2Kb([II]). There are two kinds of protein with molecular weight of 42K and 45 K respectively. This protein is highly susceptible to the presence of the enzyme.しかし、サイト【II】には95Kの蛋白が结合することがわかった。As a result, the development of this protein is related to the structural constraints of the tissue and the construction of specific structures. During the development process of liver, the active type structure was constructed, and the active type structure was constructed. These results indicate that the existence of the active promoter is necessary for the development of the gene.

项目成果

蛋白質・核酸・酵素. 31. (1986)

蛋白质、核酸和酶。31。（1986）

癌と化学療法. 12-2. (1985)

癌症和化疗。12-2。

J.Mol.Biol.153. (1985)

J.Mol.Biol.153。