組織特異性をもつ酵素補充療法用リポソームの開発

用于酶替代疗法的组织特异性脂质体的开发

• 批准号: 60227007
• 负责人: 保田 立二
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60227007/
• 关键词: 小さなリポソーム; 薬剤封入効率; 高い脂質濃度; 酵素分子

小さなリポソームは 細網内皮系細胞に捕捉、除去され難いので、実質細胞や癌細胞に薬剤を搬送する目的に適していると考えられる。しかし、その薬剤封入効率はたかだか1%程度と低く、高価な薬剤を封入する場合にはこのことが大きな欠点であった。本研究では、小さなリポソームを酵素のキャリヤーとして利用するための基礎として、封入率の良い小さなリポソームの作製法について検討した。その結果、極めて高い脂質濃度で多重層膜リポソームを超音波処理することによって、封入効率の良い小さなリポソームが得られることを見い出した。卵黄レシチン、コレステロールとホスファチジン酸をモル比1:0.5:0.1の割合で用いて、多重層膜リポソームを調製した後に、この多重層膜リポソームを超音波処理して小さなリポソームとした。リポソーム調製に用いる脂質濃度を、従来用いられてきた濃度(10〜40mM)に比較して著しく高めたところ、ショ糖やアドレアマイシン等の封入効率が大きく増加した。256mMの脂質濃度の場合、ショ糖(50mM)とアドレアマイシン(8.6mM)の封入率は各々39%と60%であった。電子顕微鏡による観察と光散乱法による粒度分布の側定から、生成したリポソームの大きさは比較的均一で、平均直径は80nmであった。また、形成したリポソームは安定で、封入した薬剤の70%〜90%を3週間以上保持していた。蛋白質を小さなリポソームに封入する手始めとして牛血清アルブミンを用いたところ、封入効率は15%程度であった。以上述べたように、水溶性分子を効率よく小さなリポソームに封入する条件を見出した。牛血清アルブミンも比較的高率に封入されることから、超音波処理に比較的耐性の酵素分子の封入に応用可能であると考えられる。

Small and medium-sized endothelial cells capture, remove, and transport cells and cancer cells for appropriate purposes. In the case of low and high penetration rates, the penetration rate is 1% or less. This study discusses the basis of enzyme utilization and the method of enzyme encapsulation. The results are as follows: high lipid concentration, multi-layer membrane separation, ultrasonic treatment, high encapsulation efficiency, and low lipid concentration. The ratio of egg yolk and egg yolk to egg yolk is 1:0.5:0.1. The ratio of egg yolk to egg yolk and egg yolk to egg yolk is 1:0.5:0.1. The concentration of lipid in the medium of the solution was increased compared with the concentration of lipid in the medium (10 ~ 40mM). At the lipid concentration of 256mM, the penetration rates of glucose (50mM) and glucose (8.6 mM) were 39% and 60% respectively. The particle size distribution was determined by electron microscopy and light scattering, and the average diameter was 80nm. 70%~ 90% of the total amount of water is sealed and maintained for more than 3 weeks. The protein content was reduced to 15%. The above conditions for the encapsulation of water-soluble molecules are shown. The high rate of encapsulation in bovine serum and the possibility of encapsulation of enzyme molecules in bovine serum by ultrasonic treatment were compared.