NMR-Strukturen des Proteaseinhibitors Dipetalin und Struktur-Funktions-Optimierungen von Fusionsproteinen mit dem plasminogenaktivierenden Protein Staphylokinase

蛋白酶抑制剂dipetaline的NMR结构以及与纤溶酶原激活蛋白葡萄球菌激酶融合蛋白的结构功能优化

• 批准号: 5212640
• 负责人: Dr. Oliver Ohlenschläger
• 金额: --
• 依托单位: Leibniz-Institut für Alternsforschung - Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5212640?language=en
• 关键词: NMR; Strukturen; des; Proteaseinhibitors; Dipetalin

Der Vierdomänen-Kazal-Inhibitor Dipetalin mit thrombinhemmender Wirkung wird als Fusionsprotein mit Staphylokinase, einem Plasminogenaktivator, exprimiert. Ziel ist, eine strukturgestützte Optimierung der thrombinhemmenden und plasminogenaktivierenden Funktionen im Hinblick auf später mögliche Anwendungen in der Therapie thromboembolischer Erkrankungen zu erreichen. Da die Lösungsstruktur der Staphylokinase von den Antragstellern bereits aufgeklärt wurde, wird mit der NMR-Strukturanalyse der N-terminalen Domänen I und II des Dipetalins begonnen. Ein in Entwicklung befindlicher "Replacement"-Ansatz soll die Strukturbestimmung durch Einbeziehung von Sequenz- und Strukturhomologien beschleunigen. Nach Strukturaufklärung der Domänen III und IV werden unter Berücksichtigung funktioneller Daten Kombinationen von Domänen untersucht. Strukturuntersuchungen an Komplexen aus Dipetalindomänen mit Thrombin bzw. Trypsin sollen schließlich klären, weshalb Dipetalin neben Thrombin auch Trypsin effizient hemmt. Die gewonnen Daten werden zur oben genannten Struktur-Funktions-Optimierung an Hybridmolekülen genutzt.

Der Vierdomänen-Kazal-Inhibitor Dipetalin mit thrombinhemmender Wirkung wird als Fusion protein mit Staphylocinase，einem Plasminogenaktivator，exhibiter.这是一种最佳的血栓形成和纤溶酶原激活功能的结构，可用于治疗血栓栓塞症。为了进一步研究葡激酶在葡萄球菌中的定位结构，我们采用核磁共振技术对Dipetalins的N端结构域I和II进行了分析。一种在“替代”方面的发展--通过对序列和结构同源性的统一分析来确定结构。Nach Strukturaufklärung der Domänen III und IV韦尔登unter Berücksichtigung funktioneller Daten Combinationen von Domänen untersucht. Dipetalindomänen与Thrombin bzw的复杂结构。胰蛋白酶溶液可溶解凝血酶，但荆芥内酯可溶解凝血酶，也可溶解胰蛋白酶。Die gewonnen Daten韦尔登zur oben genannten Struktur-Funktions-Optimierung an Hybridmolekülen genutzt.