子宮頚部癌発生におけるヒトパピローマウイルスの意義の確立

确定人乳头瘤病毒在宫颈癌发展中的重要性

• 批准号: 61015107
• 负责人: 中島 孝
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61015107/
• 关键词: 子宮頚癌; ヒトパピローマウィルス; 免疫組織化学; トランスフェクション; ウィルス特異mRNA【E_6】・【E_7】領域

ヒト子宮頚部異型上皮におけるヒトパピローマウイルス(HPV)感染状況をPapillomavirus nenus-specific common antigenに対する特異抗体を用いて免疫組織化学的に検討した。その結果、HPVは上皮内癌を含めた異型上皮症例207例中32例(15%)に認められた。HPV感染は免疫組織化学的に詳しく見ると、中等度異型上皮病変に高率に(30%)認められ、異型性を増す程低下した。癌細胞にはHPV陽性所見は観察されなかった。よって、日本人の子宮頚部病変におけるHPV感染状況は、免疫組織化学的検察でみる限り、諸外国の報告とほぼ同様であることが明らかとなった。現在は、特にHPV-16型ならびに18型に焦点をしぼり、子宮頚癌と子宮頚部異型上皮におけるHPV-DNAの存在をIn situ hybridizationを用いて検討すべく、その手法の開発に努力しているところである。分子生物学的アプローチでは、HPV-16型を持つ子宮頚癌より得られたDNAをNIH3T3細胞にトランスフェクションしたところ、トランスホーマントを得ることができた。そこでトランスホーミング領域をコスミッドにクローニングし、構造解折を行なったところ、ウィルスの【E_6】ならびに【E_7】領域が含まれていることが分った。また【E_6】領域はトランスホーマント中でmRNAとして発現していた。HPV-18型をもつHeLaの細胞中のHPVの由来の2種類のmRNA〔3.4kb,1.6kb)のcDNAをクローニングし構造解析を行なった。2種類のmRNAとも、細胞に組み込まれたHPV-18型DNAがウイルス側から細胞DNA側へread throughした融合mRNAであることが分った。1.6kbmRNAには蛋白質に翻訳されるような【E_6】領域と【E_7】領域由来の塩基配列が存在していた。また、両方のmRNAのヒト由来の部分は塩基配列が共通しており、2つのmRNAは同じ箇所のHPV-DNAが異なった2通りのスプライシングで転写されたものであることが明らかとなった。

ヒ ト uterine abnormal epithelial 頚 department に お け る ヒ ト パ ピ ロ ー マ ウ イ ル ス (HPV) infection status を Papillomavirus nenus - specific common antigen に す seaborne を る specific antibody with い て of immunohistochemical に beg し 検 た. The results of そ <s:1> showed that among 207 cases of HPV <s:1> intraepithelial carcinoma を with めた dysplasia, 32 cases (15%)に recognized められた. HPV infection は immunohistochemical に detailed し く see る と, moderate degree of abnormal epithelial disease - に に high rate (30%) to recognize め ら れ, atypia を raised す low cheng し た. Cancer cells に に HPV positive findings 観 観 observe されな った った. よ っ て, Japanese の 頚 uterus disease - に お け る HPV infection status は and examines the immunohistochemical 検 で み る り limit, the foreign の report と ほ ぼ with others で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. Now は, に HPV - 16 な ら び に type 18 に focus を し ぼ り と 頚 cancer, uterus abnormal epithelial 頚 department に お け る HPV - の exist を DNA In situ hybridization を with い て beg す 検 べ く, そ の gimmick の open 発 に efforts し て い る と こ ろ で あ る. Molecular biology ア プ ロ ー チ で は, HPV - 16 を つ 頚 uterine cancer よ り have ら れ た DNA を NIH3T3 cells に ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン し た と こ ろ, ト ラ ン ス ホ ー マ ン ト を have る こ と が で き た. そ こ で ト ラ ン ス ホ ー ミ ン グ field を コ ス ミ ッ ド に ク ロ ー ニ ン グ し, structure solution fold line を な っ た と こ ろ, ウ ィ ル ス の な E_6 】 【 ら び に field contains が ま E_7 】 【 れ て い る こ と が points っ た. ま た field E_6 】 【 は ト ラ ン ス ホ ー マ ン ト で in mRNA と し て 発 now し て い た. HPV - 18 を も つ HeLa の cells の HPV の origin の 2 kinds の mRNA (3.4 KB, 1.6 KB) の cDNA を ク ロ ー ニ ン グ し structure line を な っ た. Group 2 kinds の mRNA と も, cell に み 込 ま れ た HPV - 18 DNA が ウ イ ル ス side か ら cell DNA side へ read through し た fusion mRNA で あ る こ と が points っ た. 1.6 kbmRNA に は protein に turn 訳 さ れ る よ う な E_6 field と 】 【 E_7 】 field origin の salt base with column が exist し て い た. ま た, struck の mRNA の ヒ ト part origin の は salt base with common column が し て お り, 2 つ の mRNA は same じ の by HPV - DNA が な っ た 2 tong り の ス プ ラ イ シ ン グ で planning write さ れ た も の で あ る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Youko Tsunokawa: International Journal of Cancer. 37. 499-503 (1986)

Youko Tsunokawa：国际癌症杂志。

Takashi Nakajima: Japanese Journal of Cancer Resesarch(Gann). 77. 891-895 (1986)

中岛隆：日本癌症研究杂志（江恩）。

Youko Tsunokawa: Proceedings of National Academy Science,USA.83. 2200-2203 (1986)

Youko Tsunokawa：美国国家科学院院刊，USA.83。