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配向生体試料系におけるパルス偏光解析法の開発

定向生物样品系统中脉冲椭偏分析方法的研制

基本信息

批准号：
61580239
负责人：
木下一彦
金额：
$ 0.9万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.既有のパルス偏光解析装置の改造ナノ秒蛍光光度計およびマイクロ秒燐光・吸収光度計の試料部を,配向試料を種々の角度で取付けられるよう改造した。筋線維の測定を念頭に,溶液中で試料角度を変えられるようなホルダーを製作した。また,パルス点灯キセノンランプの導入により,時間分解能を多少犠牲にして高精度偏光測定を可能にした。また,配向系の偏光測定においては,通常の90゜光学系と顕微鏡のインライン光学系が相補的なデータを与えるので,顕微鏡に可変視野の偏光測光系を取付けられるようにした。2.配向系の偏光解消の解析理論Wigner Rotation Matrixによる配向系の偏光解消の定式化を行なった。筋線維,生体膜など全体として軸対象な系における偏光解消を,何程かの局所座標系の畳み込み(例えばプローブ座標系,ミオシン頭部座標系,ミオシン線維軸座標系,筋線維軸笹標系など)で表わせた。これにより,適当なモデルに対応する偏光解消曲線を数値計算できる。積分により定常光励起データの解析も可能である。3.筋線維中のミオシン頭部の運動の解析ミオシン頭部を三重項プローブエオシンで標識し,筋原線維および筋線維を用いて運動状態および配向の解析を行なった。硬直状態ではミオシン頭部は全く動かず,その長軸は線維軸と約45゜の角をなすこと,ピロリン酸処理後の硬直状態ではこの角度が約50゜となること,弛緩状態ではミオシン頭部は大きく揺れ動くがある程度の配向は残ること,などがわかった。4.紫膜の構造解析バクテリオロドプシンのリジン41を蛍光色素で標識し,偏光蛍光エネルギー移動法により位置を決定した。

1. The modification of existing polarization analyzer is based on the sample part of the second spectrophotometer, and the angle of alignment sample is selected. The angle of the sample in the solution For example, the time resolution can be reduced to a high degree of accuracy for polarization measurement. The polarization measurement of the alignment system is usually based on the complementary optical system of the 90 ° optical system and the optical system of the micro-mirror. 2. Analytical Theory of Polarization Resolution of Alignment Systems Wigner Rotation Matrix In the case of linear coordinate system, the polarization of the biological membrane is resolved by the whole axis coordinate system, and the local coordinate system is divided into two parts (e.g., the coordinate system of the head, the coordinate system of the linear axis, and the coordinate system of the linear axis). The polarization curve is calculated according to the equation. The integration of the constant excitation is possible. 3. The analysis of the motion of the head in the tendon dimension and the analysis of the orientation of the motion in the tendon dimension are carried out. Hard straight state: head is fully moved, long axis: linear axis: angle: about 45 °; acid treated hard straight state: angle: about 50 °; relaxed state: head is fully moved, alignment: residual; 4. The structure of the purple film is analyzed by the method of polarization and color shift.