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一分子生理学の立ち上げ:一個の分子機械の機能と構造変化の直接観察

推出单分子生理学：直接观察单分子机器的功能和结构变化

基本信息

批准号：
04F04188
负责人：
木下一彦
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Waseda University (2005-2006)National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities (2004)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

ATP駆動の回転分子モーターであるF1-ATPase(以下F1)は、回転子であるγサブユニットを外力により逆回転させると、ADPと燐酸からATPを合成する。すなわち、化学エネルギー(ATP加水分解により得られる自由エネルギー)と力学エネルギー(回転に伴う力学的仕事)をどちら方向にも変換できる、可逆なエネルギー変換分子機械である。ATP分解のほうがどのように回転を生み出すかにかんしては、かなり分かってきたが、合成のほうはまだ基礎データもほとんどない。我々は、合成機構に迫るため、γサブユニットに1μm程度の磁気ビーズを結合させ、電磁石によりビーズを自在に回転させる系を開発した。磁力が強いときは、正逆どちらの方向にもビーズ(従ってγ)を何回転でも回転させることができ、この操作でF1は壊れない。ところが磁力を弱めていくと、溶液条件により回転させられる場合とできない場合があることを発見した。逆回転(ATP合成方向)の場合、溶液中にADPと燐酸が両方存在するとき、弱い力でも回転させられる。正方向の場合は、ATPの存在が回転を容易にする。当たり前のようであるが、これらの結果は、F1の中にスイッチが内蔵されていて、必要な基質を溶液中から結合できたときに始めてスイッチがオンになって先に進める(回転を続けられる)仕掛けになっていることを意味する。効率よいエネルギー変換のためには(空回りを防ぐには)スイッチが必要なことは予想されていたが、実験的証明は初めてと思われる。F1の構造から、各スイッチ(基質ごとに異なると予想)は120度おきに3個あると考えられるが、実際にそれを示唆するデータが得られた。

The ATP response molecules were linked to F1-ATPase (below F1), the substrates were loaded with γ-rays, the external forces were used to reverse the response, and the ADP molecules were synthesized by ATP. ATP, chemical, chemical, chemical and chemical. ATP is used to analyze the data in order to make sure that the data is different from each other, and that the data is synthesized. We, the synthesizer and the synthesizer are forced to operate at the temperature of 1 μ m. The magnets are used in combination and the magnets are free to operate. The magnetic force is very strong, the direction of the magnetic force is strong, the direction is positive and negative, and the direction is positive and negative. The magnetic force is weak, the solution condition is weak, and the solution condition is low. The reverse reaction (direction of ATP synthesis), the presence of ADP in the solution and the presence of acid in the solution. In the positive direction, "close", "ATP" exist "easy to return". In the first place, the results of the test, the results of the results, the results, the results and the results. In the first place, I don't know if it is necessary to think about it in the first place. F1 is responsible for the construction of the airport, the basic education program is expected to run at 120 degrees, and the international trade organization shows that it is successful in instigating students to do well.