Kaliumkanal-Adenylylcyclase aus Paramecium

来自草履虫的钾通道腺苷酸环化酶

基本信息

项目摘要

Wir haben aus dem Ciliaten Paramecium ein Gen für eine Adenylylcyclase kloniert, das für ein 97 kDa Protein kodiert. Es ist aus folgenden Domänen aufgebaut: a) voltage sensor; b) p-loop; c) monomere Adenylylcyclase katalytische Einheit; d) tetratricopeptide; e) konserviertes Carboxylende. Das Protein wird heterolog exprimiert und die Einzeldomänen untersucht. Es werden die enzymatischen Eigenschaften charakterisiert, die Ionenleitfähigkeit wird in black lipid membranes, in Xenopus Oocyten und in HEK293 Zellen untersucht. Wir wollen wissen, wie ein spannungsabhängiger Ionenstrom mit der Regulation einer Adenylylcyclase, im weiteren Sinne mit einem Enzym, gekoppelt ist. Gene für baumusteridentische Adenylylcyclasen sind in Tetrahymena und dem Malariaerreger Plasmodium identifiziert/kloniert worden. Sequenzvergleiche bilden die Grundlage für Mutationen zur funktionellen Charakterisierung. Dazu wird zusätzlich eine Mutante von Paramecium, restless, mit einem Defekt im K+-Strom/in der cAMP-Regulation verwendet. Antikörper werden zur Expressionskontrolle und zur immunhistochemischen Lokalisation hergestellt.
本文研究了<s:1> r eine腺苷基环化酶(kloniert)与<s:1> r ein979kda蛋白(kdiert)的关系。a)电压传感器;b) p-loop;c)单粒腺苷酸环化酶催化;d) tetratricopeptide;e)羧基硫醚。Das蛋白异源实验与死亡Einzeldomänen untersut。Es werden die酶(Eigenschaften charakterisiert), die Ionenleitfähigkeit在黑色脂质膜上,在非洲爪蟾卵母细胞上,在HEK293 zellunsucht上。Wir wollen wissen, wie ein spannungsabhängiger Ionenstrom mit der Regulation iner adenylycyclase, im weiteren Sinne mit einem enzyme, gekoppelt ist。四膜虫和疟疾热疟原虫的腺苷基环化酶基因序列。序列分析与遗传变异分析[j]。大足风zusätzlich eine Mutante von草履虫,不安,mit einem defkt im K+-Strom/in der cAMP-Regulation verwendet。Antikörper werden zur表达控制和zur免疫组织化学定位。

项目成果

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