Kaliumkanal-Adenylylcyclase aus Paramecium

来自草履虫的钾通道腺苷酸环化酶

• 批准号: 5215870
• 负责人: Professor Dr. Joachim E. Schultz
• 金额: --
• 依托单位: Pharmazeutisches Institut
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5215870?language=en
• 关键词: Kaliumkanal; Adenylylcyclase; aus; Paramecium

Wir haben aus dem Ciliaten Paramecium ein Gen für eine Adenylylcyclase kloniert, das für ein 97 kDa Protein kodiert. Es ist aus folgenden Domänen aufgebaut: a) voltage sensor; b) p-loop; c) monomere Adenylylcyclase katalytische Einheit; d) tetratricopeptide; e) konserviertes Carboxylende. Das Protein wird heterolog exprimiert und die Einzeldomänen untersucht. Es werden die enzymatischen Eigenschaften charakterisiert, die Ionenleitfähigkeit wird in black lipid membranes, in Xenopus Oocyten und in HEK293 Zellen untersucht. Wir wollen wissen, wie ein spannungsabhängiger Ionenstrom mit der Regulation einer Adenylylcyclase, im weiteren Sinne mit einem Enzym, gekoppelt ist. Gene für baumusteridentische Adenylylcyclasen sind in Tetrahymena und dem Malariaerreger Plasmodium identifiziert/kloniert worden. Sequenzvergleiche bilden die Grundlage für Mutationen zur funktionellen Charakterisierung. Dazu wird zusätzlich eine Mutante von Paramecium, restless, mit einem Defekt im K+-Strom/in der cAMP-Regulation verwendet. Antikörper werden zur Expressionskontrolle und zur immunhistochemischen Lokalisation hergestellt.

我们从纤毛虫草履虫中发现了一种腺苷酸环化酶，即一种97 kDa的蛋白质。这是一种由下列部分组成的结构：a）电压传感器; B）p-环; c）单体腺苷酸环化酶催化剂; d）三肽四肽; e）羧基保护剂。这种蛋白质会表现出异源性，并使其成为一种特殊的蛋白质。在非洲爪蟾卵母细胞和HEK 293 Zellen中，酶的特征性韦尔登和黑色脂质膜中的离子强度都很高。我们想知道，就像一个有腺苷酸环化酶调节的离子流，在其他有酶的国家，也是如此。四膜虫和疟疾病原体中的包埋型腺苷酸环化酶基因可识别出疟原虫/克隆沃登。Sequenzvergleiche bilden die Grundlage für Mutationen zur funktionellen Charakterisierung.大足野生型草履虫是一种不安分的突变体，在钾离子胁迫/cAMP调节下存在缺陷。Antikörper韦尔登zur表达控制和zur免疫组化定位hergestellt。