Adenylatcyclase in der Zellmembran von Mycobacterium tuberculosis

结核分枝杆菌细胞膜中的腺苷酸环化酶

基本信息

项目摘要

Im Genom von Mycobacterium tuberculosis sind 16 offene Leseraster für Adenylatcyclasen (ACn). Das AC-Gen Rv 1625c ist in Bakterien einzigartig, da die berechnete Membrantopologie des Proteins den membrangebundenen, pseudoheterodimeren AC aus Säugern ähnelt. Rv1625c kodiert für eine AC mit je einem Membrananker (sechs Membrandurchgänge) und einer katalytischen Domäne (C), d.h. für eine Mammalia-'Halb'-Cyclase. Dieses AC Gen wurde aus M. tuberculosis kloniert und in E. coli und human embryonic kidney Zellen, HEK293, enzymatisch aktiv exprimiert. Das rekombinante Holoenzym kann vollständig gereinigt werden. Die AC Aktivität ist mit der Bildung eines Homodimers verbunden. Wir untersuchen die katalytischen Eigenschaften und Regulation dieser mycobakteriellen AC, u.a. besonders die Rolle des Membranankers. Wir ermitteln, wann diese AC exprimiert wird und wo sie lokalisiert ist. Da die AC in HEK293 aktiv exprimierbar ist, werden wir klären, ob sie als Teil eines mycobakteriellen Toxinsystems fungieren kann, das in infizierte Säugerzellen eingeschleust wird. Daher prüfen wir die Funktionsäquivalenz der Membrananker von M. tuberculosis und Säuger-ACn. Schließlich werden wir versuchen, die Kristallstruktur der membrangebundenen mycobakteriellen AC aufzuklären.
Im Genom von 结核分枝杆菌 sind 16 offene Leseraster für Adenylatcyclasen (ACn)。 AC-Gen Rv 1625c 位于 Bakterien einzigartig 中,是蛋白质膜拓扑学、伪异二聚体 AC 的组成部分。 Rv1625c kodiert für eine AC mit je einem Membrananker (sechs Membrandurchgänge) 和 einer katalytischen Domäne (C), d.h. für eine Mammalia-'Halb'-Cyclase。 Dieses AC Gen wurde aus 结核分枝杆菌 kloniert 和大肠杆菌和人胚胎肾 Zellen,HEK293,酶活性实验。 Das rekombinante Holoenzym kann vollständig gereinigt werden。 AC Aktivität ist der Bildung eines Homodimers verbunden。 Wir untersuchen die katalytischen Eigenschaften und Regulatorydieser mycobakteriellen AC, u.a. besonders die Rolle des Membranankers。 Wir ermitteln,wann diese AC exprimiert wird wo sie lokalisiert ist。在 HEK293 激活前的 AC 中,我们可以看到真菌毒素系统的真菌感染,并导致 Säugerzellen eingeschleust wird。结核分枝杆菌和 Säuger-ACn 膜的功能。如果发生了这种情况,则 Kristallstruktur der membrangebundenen mycobakteriellen AC aufzuklären。

项目成果

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