Aquaporine des Innenohrs: Signaltransduktion und Volumenregulation der Endolymphflüssigkeit
内耳的水通道蛋白:内淋巴液的信号转导和容量调节
基本信息
- 批准号:5370292
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Priority Programmes
- 财政年份:1997
- 资助国家:德国
- 起止时间:1996-12-31 至 2003-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Die Endolymphe ist eine hoch kaliumhaltige extrazelluläre Flüssigkeit, deren Ionen- und Volumenregulation für die sensorischen Innenohrfunktionen essentiell ist. Durch RT-PCR haben wir das Expressionsmuster von zellulären Wasserkanälen, Aquaporinen (AQP), quantitativ im Innenohr bestimmt. Im endolymphatischen Sack, dem Ort der Endolymph-Volumenregulation, fanden wir das nierenspezifische Vasopressin/cAMP-regulierte AQP2. Hinweise deuten auf einen umgekehrten Vasopressin-Effekt im Innenohr. Wir haben eine immortalisierte Zellinie des endolymphatischen Sacks (mES13) etabliert. Wir werden Aquaporine und Vesikeltransportproteine subzellulär lokalisieren und untersuchen die Kopplung von Vasopression-Rezeptor und Adenylatcyclase durch Enzym-Assays. Wir exprimieren Fusionsproteine aus AQP2 und dem green fluorescent protein zur visuellen Verfolgung und Aufzeichnung des Vesikeltransports in mES13-Zellen. Wir bestimmen und charakterisieren die Signalkette der AQP-2 Regulation. Wir identifizieren beteiligte Proteine durch Expressionshemmung mit anti-sense RNA. Der Effekt von Änderungen der Ionenkonzentration, besonders von Ca2+, auf die AQP-Regulation und -Expression im endolymphatischen Sack des Innenohrs wird untersucht.
Die Endolymphe ist eine hoch kaliumhaltige extrazelluläre Flüssigkeit,deren Ionen- und Volumenregulation für die sensorischen Innenohrfunktionen essentiell ist.通过RT-PCR,我们对Zellulären Wasserkanälen、Aquaporinen(AQP)的表达进行了定量评估。在内淋巴袋中,内淋巴体积调节的目的是使加压素/cAMP调节AQP 2的特异性降低。Hinweise deuten auf einen umgekehrten Vasopressin-Effekt im Innenohr.我们有一个永久性的Zellinie内淋巴袋(mES 13)。我们用酶法测定了韦尔登水通道和血管转运蛋白的局部表达,并探讨了血管加压素受体和腺苷酸环化酶的相互作用。我们将AQP 2和绿色荧光蛋白融合蛋白用于mES 13-Zellen中可见的Vesikeltransports的转运和增强。我们对AQP-2调节的信号传导机制进行了评估和表征。我们用反义RNA进行表达,鉴定了该蛋白。研究了Ca 2+对内淋巴袋内AQP的调节和表达的影响。
项目成果
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