Aquaporine des Innenohrs: Signaltransduktion und Volumenregulation der Endolymphflüssigkeit

内耳的水通道蛋白:内淋巴液的信号转导和容量调节

基本信息

项目摘要

Die Endolymphe ist eine hoch kaliumhaltige extrazelluläre Flüssigkeit, deren Ionen- und Volumenregulation für die sensorischen Innenohrfunktionen essentiell ist. Durch RT-PCR haben wir das Expressionsmuster von zellulären Wasserkanälen, Aquaporinen (AQP), quantitativ im Innenohr bestimmt. Im endolymphatischen Sack, dem Ort der Endolymph-Volumenregulation, fanden wir das nierenspezifische Vasopressin/cAMP-regulierte AQP2. Hinweise deuten auf einen umgekehrten Vasopressin-Effekt im Innenohr. Wir haben eine immortalisierte Zellinie des endolymphatischen Sacks (mES13) etabliert. Wir werden Aquaporine und Vesikeltransportproteine subzellulär lokalisieren und untersuchen die Kopplung von Vasopression-Rezeptor und Adenylatcyclase durch Enzym-Assays. Wir exprimieren Fusionsproteine aus AQP2 und dem green fluorescent protein zur visuellen Verfolgung und Aufzeichnung des Vesikeltransports in mES13-Zellen. Wir bestimmen und charakterisieren die Signalkette der AQP-2 Regulation. Wir identifizieren beteiligte Proteine durch Expressionshemmung mit anti-sense RNA. Der Effekt von Änderungen der Ionenkonzentration, besonders von Ca2+, auf die AQP-Regulation und -Expression im endolymphatischen Sack des Innenohrs wird untersucht.
Die Endolymphe ist eine hoch kaliumhaltige extrazelluläre Flüssigkeit,deren Ionen- und Volumenregulation für die sensorischen Innenohrfunktionen essentiell ist.用RT-PCR方法检测细胞内水通道蛋白(AQP)的表达。在内淋巴袋中,内淋巴体积调节的目的是使加压素/cAMP调节AQP 2的特异性降低。Hinweise deuten auf einen umgekehrten Vasopressin-Effekt im Innenohr.我们有一个永久性的Zellinie内淋巴袋(mES 13)。我们用酶法测定了韦尔登水通道和血管转运蛋白的局部表达,并探讨了血管加压素受体和腺苷酸环化酶的相互作用。我们将AQP 2和绿色荧光蛋白融合蛋白用于mES 13-Zellen中可见的Vesikeltransports的转运和增强。我们对AQP-2调节的信号传导机制进行了评估和表征。我们用反义RNA进行表达,鉴定了该蛋白。研究了Ca 2+对内淋巴袋内AQP的调节和表达的影响。

项目成果

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知道了