Molekulare Charakterisierung und funktionelle Bedeutung der zellzyklus-spezifischen Phosphorylierung des Lamin assoziierten Polypeptids (LAP) 2

核纤层蛋白相关多肽 (LAP) 2 细胞周期特异性磷酸化的分子特征和功能意义

• 批准号: 5216610
• 负责人: Dr. Andreas Paul Gajewski
• 金额: --
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5216610?language=en
• 关键词: Molekulare; Charakterisierung; und; funktionelle; Bedeutung

Das Lamina-assoziierte Polypeptid 2a (LAP2a) scheint Bestandteil der Kernmatrix zu sein und eine wichtige Funktion bei der Kernstrukturierung im Verlauf des Zellzyklus zu besitzen. Erste Untersuchungen im Labor von Dr. Roland Foisner haben gezeigt, daß Verteilung und Interaktion von LAP2a höchstwahrscheinlich durch Phosphorylierung reguliert werden. Die äußerst wichtige biochemische Charakterisierung einer möglichen Phosphorylierung von LAP2a auf struktureller und funktioneller Ebene ist jedoch bis jetzt noch nicht erfolgt und soll daher im Verlauf des eingereichten Projektes durchgeführt werden. In einem ersten Schritt ist geplant, zellzyklusspezifische Phosphorylierungsstellen im LAP2a und die an der Phosphorylierung beteiligten Kinasen zu identifizieren. In einem zweiten Schritt sollen die identifizierten Phosphorylierungsstellen mutiert werden, so daß sie entweder nicht mehr phosphoryliert werden können oder eine ständige Phosphorylierung vorgetäuscht wird. Im dritten Schritt soll mit diesen Mutanten die funktionelle Bedeutung der Phosphorylierung im Hinblick auf Chromosomenbindung und Interaktion mit anderen Bindungspartnern im Verlauf des Zellzyklus untersucht werden. Der Einfluß der Mutanten auf die Kernbildung soll in vitro in Extrakten von Säugetieren und von Xenopus Eiextrakten getestet werden. Ferner soll durch Expression der Mutanten in Zellen ihr Einfluß auf den Verlauf der Zellteilung und die Kernstrukturierung in vivo untersucht werden.

LAP2a在Zellzyklus的核基质中表现出良好的稳定性和重要的核结构功能。罗兰福斯纳博士的第一次实验是通过韦尔登调节对LAP 2进行的最后一次测试和交互。在韦尔登的一个工程项目中，LAP 2a的生物化学特性对结构和功能都有很大的影响。在第一个Schritt装置中，在LAP 2a中测定磷含量，并确定磷含量。在一个两个不同的Schritt sollen die identifizierten Phosphorylierungsstellen mutiert韦尔登，so davidsie entweder nicht梅尔phosphorylert韦尔登können or der eine ständige Phosphorylierung vortetäuscht wird. Schritt博士在论文中提出了一种新的方法，该方法通过改变磷酸盐在Hinblick中的作用，使其与韦尔登的结合和相互作用成为可能。在离体条件下，对Säugetieren和Xenopus Eiextrakten提取物韦尔登中的突变体对种子培养的影响进行了测试。通过突变体在细胞中的表达，可以影响细胞的生长，并在体内形成韦尔登结构。