抗ガングリオシド・モノクローナル抗体によるメラノーマの免疫療法に関する基礎的研究

抗神经节苷脂单克隆抗体黑色素瘤免疫治疗的基础研究

• 批准号: 62015104
• 负责人: 田井 直
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62015104/
• 关键词: ガングリオシド; モノクローナル抗体; 腫瘍抗原; 細胞障害作用; メラノーマ

1.抗ガングリオシド抗体(202)の樹立 ヒトメラノーマ細胞株(M14)をBalb/cマウスに免疫して得られた(UCLA医学部入江礼子教授との共同研究). IgMクラスであった.2.202抗体のエピトープの同定 M14細胞の202抗原は熱処理,トリプシン処理にて安定な性質を示したので糖脂質が考えられた. 抗原活性はM14細胞より抽出したガングリオシド分画のみに検出され中性糖脂質分画には検出されなかった. このガングリオシドをTLCで展開しその抗原活性を免疫染色法と免疫粘着阻止テストで検索したところ,活性はモノシアロガングリオシドすなわちGM3とGM2に一致して検出された. ジシアロガングリオシドGD_3,GD_2には全く認められなかった. 次に糖脂質標準品22種類を用いてその反応性をELISAと免疫粘着阻止テストで調べた. 反応した糖脂質は9種でいずれも末端にSiaα2→3Galの2糖を持つモノシアロガングリオシドであり, GM4が一番強い反応性を示した. シアル酸はNーアセチル型とNーグリコリル型双方同程度に反応することが判明した. 尚,202抗体はM14細胞のNPー40可溶化糖蛋白質画分とは免疫沈降反応を示さなかった.3.202抗体の各種ヒト腫瘍細胞との反応性 種々のヒト腫瘍細胞に対する反応性を免疫粘着テストにて調べた. メラノーマやその他の腫瘍細胞株とは強く反応したが, 正常組織(皮膚,肝,腎,筋肉,末梢血球等)とは全く反応しなかった.4.202抗体の細胞障害作用の検討 IgM抗体である202はヒト血清在存下M14細胞に対して非常に強い補体依存性細胞障害作用を有することが判明した. すなわち抗体濃度100ng/mlで1時間以内に約80%以上の細胞が障害を受けた. 一方抗体依存性細胞介在性細胞障害作用は全く認められなかった. 今後はヌードマウスに移植したヒトメラノーマ細胞等に対する抗腫瘍効果の検討が必要である. 最終的には臨床実験治療が不可欠となる.

1. The cell line (M14) was isolated from the cell line (M14), which was co-studied by Professor Jiang Lizi of the Department of UCLA Medicine (UCLA Department of Medicine). IgM antigens. 2.202 antibodies homology to M14 cells 202 antigens, antigens and antigens. Antigenic activity: M14 cell, extract, extract, extract. The antigen activity was detected by TLC immunostaining. The immune adhesion was blocked by immuno-adhesion. The activity was blocked by GM3. The GM2 was consistent. I don't know what to do with GD _ 3. GD _ 3. GD2. Secondary glycolipid standard 22, anti-ELISA immune adhesion is used to prevent the infection of diabetes. In the end of 9 kinds of glycolipids, Sia α 2 3Gal 2 sugars were used. GM4 showed strong reactivity. There is no difference between the two sides in the same degree. In addition, 202 antibody M14 cell NP 40 soluble glycoprotein assay assay immuno-precipitation assay assay. 3.202 antibody to all kinds of antibody cells. Anti-M14 cells were sensitive to immuno-adhesion. The normal tissues (skin, liver, muscle, tendon, peripheral blood cells, etc.) were all negative. 4.202 antibody showed cellular damage effect, IgM antibody antibody had a significant effect on M14 cell strain, and there was a significant correlation between M14 cell strain and strength-dependent cell damage. It is estimated that the antibody level of 100ng/ml is more than 80% within a period of time. One side is antibody-dependent, cellular mediator, cellular barrier, total antibody-dependent cytopathic effect. In the future, you will need to transplant your home, and so on. If so, you will find it necessary. The most expensive bed can not be owed to the doctor.

项目成果

Tadashi Tai.: Biochim.Biophys.Acta. 958. 134-138 (1988)

泰正：生物化学学报。